КОРОНАВИРУС
Re: КОРОНАВИРУС
Лукашенко устроил чиновникам разнос из-за штрафов за нарушение масочного режима
Александр Лукашенко сегодня устроил разнос руководству Минздрава и МВД за меры по контролю масочного режима. Это произошло во время совещания об эпидемиологической ситуации в стране. Лукашенко отметил, что коронавирус остается угрозой, поинтересовался текущей ситуацией призвал бороться с коронафейками. Далее он подчеркнул, что собрал чиновников для обсуждения вопросов лечения людей, а не борьбы с COVID-19. Как пишет пресс-служба Лукашенко, он обратился с министру здравоохранения Дмитрию Пиневичу с вопросом, все ли присутствующие на совещании здоровы. Министр ответил, что да. Тогда Лукашенко поинтересовался, подтверждается ли это ПЦР-тестами или прохождением карантина. «Вы их на карантин посадили перед встречей с президентом, ПЦР-тесты сделали?», — спросил Лукашенко. Министр ответил отрицательно. На что Лукашенко возмутился: как так к нему пришли без тестов? «А как это так, вы пришли к главе государства, к президенту (а он же один в Беларуси) и не проверили здесь присутствующих? Что это за отношение к тому, в чем вы меня постоянно убеждаете. Я не зря вам задал этот вопрос, Дмитрий Леонидович. Вы правильно сделали. Потому что у нас это не принято. Хотя во всем мире к президенту люди не заходят без карантина, я не говорю, непроверенные», — добавил Лукашенко. Он пояснил, что специально задал такие вопросы. Они были нужны, чтобы подвести к обсуждению противоэпидемических мер, которые были введены неделю назад, а также усиление контроля за их соблюдением. «Я специально задал вопрос, чтобы задать следующий вопрос: если вы к президенту, открыв ногой дверь заходите, так зачем же вы издеваетесь над людьми? Если к президенту вы свободно заходите?» — сказал Лукашенко. Он подчеркнул, что за весь период пандемии ни у одного человека, шедшего на встречу к нему не интересовались наличием прививки или теста. Издевательством же Лукашенко считает принудительную вакцинацию и требование ходить в масках. «Одна Кочанова возмущалась всегда: как так, к президенту идут! Она ответственная по Минску, а Дворец Независимости в Минске — она всегда возмущалась. Ну, повозмущается, и сама приходит без тестирования. А почему людей тогда напрягаем? Почему подняли гвалт на всю страну? Почему милицию мобилизовали на проверки масочного режима. Щупаете везде, даже женщин не щадя», — бросил упрек Лукашенко. Он обратился и к министру внутренних дел Ивану Кубракову. Лукашенко уверен, что силовикам есть, чем заняться. «Я же вас предупреждал. Вам что, нечем заниматься? Вы почему закон нарушаете? У нас нет закона такого. Вы кому подыгрываете? Так уж если лечите, то лечите как следует. Начиная от этой зоны и заканчивая везде на улицах, Дмитрий Леонидович. Подняли бучу на всю страну. Я думаю, губернаторы нас услышали. А то вот я смотрю в Бресте уже штрафовать начали, и уже силой, коленом на грудь заставляют вакцинироваться. Я же вас просил не допускать этого!» — сказал Лукашенко. Он обратил внимание, что часть участников совещания пришли во Дворец независимости в масках. По его мнению, это их право. «Это их право. Я никого не заставляю. Тертель ко мне приходит — никогда маску не одевает. Господь с ним. Пиневич приходит, маску в приемной бросил и зашел. Я никого не заставляю. Это ваше право», — сказал он. Лукашенко уверен, что если какой-то чиновник заразится коронавирусной инфекцией, то не придет к нему. Точно также должны поступать и все беларусы. «Тем более, что мы темним перед людьми? Мы же не все знаем об этой болезни. И каждый человек должен распоряжаться своей судьбой так, как он считает нужным. Но мы об этом сейчас поговорим. Видите ли, людей они начали штрафовать. Кто вам дал право на это? Где, в каком законе написано, что вы имеете право штрафовать людей?» — поинтересовался он. Александр Лукашенко добавил, что пока милиция пытается контролировать масочный режим, неизвестные режут в Гомельской области скот и продают в Россию. «У нас в Гомельской области, вот спросите у Субботина и у министра, коров по ночам режут и продают в Россию. Справиться не можем. А милиция у него масочников ловит. Не дай бог ты мне не выловишь эту мразь в течение двух недель! Распоясались, дальше некуда!» — упрекнул он главу МВД. В итоге Александр Лукашенко поручил министру здравоохранения вернуться к практике предыдущих волн пандемии. «Мы ведем себя безобразно, а людей заставляем быть идеальными. Нет, Дмитрий, так дело не пойдет. Возвращайтесь к тому, что мы делали в первую волну», — сказал он. Надо отметить, что в первую волну в Беларуси вводились ограничения на проведение массовых мероприятий. Маски рекомендовалось носить, а для продавцов магазинов и некоторых других категорий работников они были обязательными, также были требования о наличии дезинфектантов, соблюдении дистанцирования и т.д. Александр Лукашенко подчеркнул, что не хочет нервировать народ, но и сам не может каждый день лечить всех заболевших. «Про бешенство я уже вам сказал: люди бесятся, кто-то возмущается, кто-то требует. Но уже вопросы: «А где наш президент?» Слушайте, я каждый день в телевизоре отчитываюсь перед людьми, чем я занимаюсь. Я же не могу каждый день с утра до вечера заниматься лечением людей. Для этого у меня есть целое министерство и тысячи-тысячи в белых халатах. Не в грязных, не в черных», — сказал он. По его словам, у него много других забот: сельское хозяйство, санкции и тысячи других вопросов. «Детский сад, честное слово. Президента потеряли: ах, он не лечит людей. Хорошо, с завтрашнего дня начну лечить. И это же наша вина, Дмитрий Леонидович. Это же мы всполошили людей своей болтовней, своими разговорами. Напрягаем, перенапрягаем, но лучше же не стало. Какие только драконовские методы вы за это время ни ввели. И что, лучше стало? Да нет. Дмитрий Леонидович, нам надо лечить людей, никуда не денемся», — продолжил он упрекать главу Минздрава. Лукашенко добавил, что сам он лично не против ношения масок другими и вакцинации также, но в первую очередь нужно заниматься лечением людей, иначе их можно довести до бунтов. «А не будем лечить людей, займемся ковидной и антиковидной политикой — доведем народ до бунтов. Будет как в Европе», — сказал он. Он уверен, что если заниматься лечением, то буквально за месяц удастся минимизировать проблему. Александр Лукашенко также негативно высказался о российских практиках. По его мнению, дополнительные меры не имеют эффекта. «Я же знаю, насколько они напряжены: там и перчатки, и маски — чего там только нет. И все равно подъем. И подъем больше, чем в Беларуси. Так вы смотрите на мир и делайте соответствующие выводы», — сказал он. В итоге он пришел к тому, что все-таки не против вакцинации, особенно, когда ее стимулируют финансовыми методами. В качестве примера он привел столичный завод, где за прививки выдают премии. «Я, конечно, против того, чтобы люди покупали свое здоровье, но это право людей и того руководителя. Но он их не напрягал. То есть разные варианты в отличие от, допустим, Брестской области, где с саблей ходят и размахивают. Возможно, и другие губернаторы себя так ведут. Но это мы отстроим мгновенно», — заключил Лукашенко., сообщает https://stoppanika.ru/news/554-lukashen ... zhima.html
Александр Лукашенко сегодня устроил разнос руководству Минздрава и МВД за меры по контролю масочного режима. Это произошло во время совещания об эпидемиологической ситуации в стране. Лукашенко отметил, что коронавирус остается угрозой, поинтересовался текущей ситуацией призвал бороться с коронафейками. Далее он подчеркнул, что собрал чиновников для обсуждения вопросов лечения людей, а не борьбы с COVID-19. Как пишет пресс-служба Лукашенко, он обратился с министру здравоохранения Дмитрию Пиневичу с вопросом, все ли присутствующие на совещании здоровы. Министр ответил, что да. Тогда Лукашенко поинтересовался, подтверждается ли это ПЦР-тестами или прохождением карантина. «Вы их на карантин посадили перед встречей с президентом, ПЦР-тесты сделали?», — спросил Лукашенко. Министр ответил отрицательно. На что Лукашенко возмутился: как так к нему пришли без тестов? «А как это так, вы пришли к главе государства, к президенту (а он же один в Беларуси) и не проверили здесь присутствующих? Что это за отношение к тому, в чем вы меня постоянно убеждаете. Я не зря вам задал этот вопрос, Дмитрий Леонидович. Вы правильно сделали. Потому что у нас это не принято. Хотя во всем мире к президенту люди не заходят без карантина, я не говорю, непроверенные», — добавил Лукашенко. Он пояснил, что специально задал такие вопросы. Они были нужны, чтобы подвести к обсуждению противоэпидемических мер, которые были введены неделю назад, а также усиление контроля за их соблюдением. «Я специально задал вопрос, чтобы задать следующий вопрос: если вы к президенту, открыв ногой дверь заходите, так зачем же вы издеваетесь над людьми? Если к президенту вы свободно заходите?» — сказал Лукашенко. Он подчеркнул, что за весь период пандемии ни у одного человека, шедшего на встречу к нему не интересовались наличием прививки или теста. Издевательством же Лукашенко считает принудительную вакцинацию и требование ходить в масках. «Одна Кочанова возмущалась всегда: как так, к президенту идут! Она ответственная по Минску, а Дворец Независимости в Минске — она всегда возмущалась. Ну, повозмущается, и сама приходит без тестирования. А почему людей тогда напрягаем? Почему подняли гвалт на всю страну? Почему милицию мобилизовали на проверки масочного режима. Щупаете везде, даже женщин не щадя», — бросил упрек Лукашенко. Он обратился и к министру внутренних дел Ивану Кубракову. Лукашенко уверен, что силовикам есть, чем заняться. «Я же вас предупреждал. Вам что, нечем заниматься? Вы почему закон нарушаете? У нас нет закона такого. Вы кому подыгрываете? Так уж если лечите, то лечите как следует. Начиная от этой зоны и заканчивая везде на улицах, Дмитрий Леонидович. Подняли бучу на всю страну. Я думаю, губернаторы нас услышали. А то вот я смотрю в Бресте уже штрафовать начали, и уже силой, коленом на грудь заставляют вакцинироваться. Я же вас просил не допускать этого!» — сказал Лукашенко. Он обратил внимание, что часть участников совещания пришли во Дворец независимости в масках. По его мнению, это их право. «Это их право. Я никого не заставляю. Тертель ко мне приходит — никогда маску не одевает. Господь с ним. Пиневич приходит, маску в приемной бросил и зашел. Я никого не заставляю. Это ваше право», — сказал он. Лукашенко уверен, что если какой-то чиновник заразится коронавирусной инфекцией, то не придет к нему. Точно также должны поступать и все беларусы. «Тем более, что мы темним перед людьми? Мы же не все знаем об этой болезни. И каждый человек должен распоряжаться своей судьбой так, как он считает нужным. Но мы об этом сейчас поговорим. Видите ли, людей они начали штрафовать. Кто вам дал право на это? Где, в каком законе написано, что вы имеете право штрафовать людей?» — поинтересовался он. Александр Лукашенко добавил, что пока милиция пытается контролировать масочный режим, неизвестные режут в Гомельской области скот и продают в Россию. «У нас в Гомельской области, вот спросите у Субботина и у министра, коров по ночам режут и продают в Россию. Справиться не можем. А милиция у него масочников ловит. Не дай бог ты мне не выловишь эту мразь в течение двух недель! Распоясались, дальше некуда!» — упрекнул он главу МВД. В итоге Александр Лукашенко поручил министру здравоохранения вернуться к практике предыдущих волн пандемии. «Мы ведем себя безобразно, а людей заставляем быть идеальными. Нет, Дмитрий, так дело не пойдет. Возвращайтесь к тому, что мы делали в первую волну», — сказал он. Надо отметить, что в первую волну в Беларуси вводились ограничения на проведение массовых мероприятий. Маски рекомендовалось носить, а для продавцов магазинов и некоторых других категорий работников они были обязательными, также были требования о наличии дезинфектантов, соблюдении дистанцирования и т.д. Александр Лукашенко подчеркнул, что не хочет нервировать народ, но и сам не может каждый день лечить всех заболевших. «Про бешенство я уже вам сказал: люди бесятся, кто-то возмущается, кто-то требует. Но уже вопросы: «А где наш президент?» Слушайте, я каждый день в телевизоре отчитываюсь перед людьми, чем я занимаюсь. Я же не могу каждый день с утра до вечера заниматься лечением людей. Для этого у меня есть целое министерство и тысячи-тысячи в белых халатах. Не в грязных, не в черных», — сказал он. По его словам, у него много других забот: сельское хозяйство, санкции и тысячи других вопросов. «Детский сад, честное слово. Президента потеряли: ах, он не лечит людей. Хорошо, с завтрашнего дня начну лечить. И это же наша вина, Дмитрий Леонидович. Это же мы всполошили людей своей болтовней, своими разговорами. Напрягаем, перенапрягаем, но лучше же не стало. Какие только драконовские методы вы за это время ни ввели. И что, лучше стало? Да нет. Дмитрий Леонидович, нам надо лечить людей, никуда не денемся», — продолжил он упрекать главу Минздрава. Лукашенко добавил, что сам он лично не против ношения масок другими и вакцинации также, но в первую очередь нужно заниматься лечением людей, иначе их можно довести до бунтов. «А не будем лечить людей, займемся ковидной и антиковидной политикой — доведем народ до бунтов. Будет как в Европе», — сказал он. Он уверен, что если заниматься лечением, то буквально за месяц удастся минимизировать проблему. Александр Лукашенко также негативно высказался о российских практиках. По его мнению, дополнительные меры не имеют эффекта. «Я же знаю, насколько они напряжены: там и перчатки, и маски — чего там только нет. И все равно подъем. И подъем больше, чем в Беларуси. Так вы смотрите на мир и делайте соответствующие выводы», — сказал он. В итоге он пришел к тому, что все-таки не против вакцинации, особенно, когда ее стимулируют финансовыми методами. В качестве примера он привел столичный завод, где за прививки выдают премии. «Я, конечно, против того, чтобы люди покупали свое здоровье, но это право людей и того руководителя. Но он их не напрягал. То есть разные варианты в отличие от, допустим, Брестской области, где с саблей ходят и размахивают. Возможно, и другие губернаторы себя так ведут. Но это мы отстроим мгновенно», — заключил Лукашенко., сообщает https://stoppanika.ru/news/554-lukashen ... zhima.html
Верните каждому своё, пусть все идут своим путём, приобретя утраты. (С)
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
Правильно говорит, народ лечить надо, особенно депутатов. Их кто-нибудь на психическую сохранность при приёме на работу проверяет?
И так везде - как только возникает потребность выслужиться, начинают кукурузу в Тундре сажать квадратно -гнездовым способом...
И так везде - как только возникает потребность выслужиться, начинают кукурузу в Тундре сажать квадратно -гнездовым способом...
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
Re: КОРОНАВИРУС
Под спойлером статья в медицинском журнале, в числе авторов которой Гинцбург.
Речь в ней о том, что вакцинация способствует мутации вируса.
«Становится очевидно, что в условиях растущего коллективного иммунитета, вырабатывающегося в результате перенесенного заболевания и вакцинации, численность вариантов SARS-CoV-2 с мутациями в RBD и S-белке будет быстро расти», — утверждается в статье.
Еще один из авторов этой статьи дала интервью Форбс (https://www.forbes.ru/forbes-woman/4413 ... irusologah):
Речь в ней о том, что вакцинация способствует мутации вируса.
«Становится очевидно, что в условиях растущего коллективного иммунитета, вырабатывающегося в результате перенесенного заболевания и вакцинации, численность вариантов SARS-CoV-2 с мутациями в RBD и S-белке будет быстро расти», — утверждается в статье.
Neutralizing Activity of Sera from Sputnik V-Vaccinated People against Variants of Concern (VOC: B.1.1.7, B.1.351, P.1, B.1.617.2, B.1.617.3) and Moscow Endemic SARS-CoV-2 Variants
by Vladimir A. Gushchin 1,2,*,†ORCID,Inna V. Dolzhikova 1,*,†ORCID,Alexey M. Shchetinin 1ORCID,Alina S. Odintsova 1ORCID,Andrei E. Siniavin 1,3ORCID,Maria A. Nikiforova 1ORCID,Andrei A. Pochtovyi 1,2ORCID,Elena V. Shidlovskaya 1,Nadezhda A. Kuznetsova 1,Olga A. Burgasova 1,4,5,Liudmila V. Kolobukhina 1,4ORCID,Anna A. Iliukhina 1,Anna V. Kovyrshina 1,Andrey G. Botikov 1,Aleksandra V. Kuzina 1,Daria M. Grousova 1,Amir I. Tukhvatulin 1ORCID,Dmitry V. Shcheblyakov 1ORCID,Olga V. Zubkova 1,Oksana V. Karpova 4,Olga L. Voronina 1ORCID,Natalia N. Ryzhova 1,Ekaterina I. Aksenova 1ORCID,Marina S. Kunda 1,Dmitry A. Lioznov 6,7,Daria M. Danilenko 6ORCID,Andrey B. Komissarov 6ORCID,Artem P. Tkachuck 1,Denis Y. Logunov 1,*,† andAlexander L. Gintsburg 1
Abstract
Since the beginning of the 2021 year, all the main six vaccines against COVID-19 have been used in mass vaccination companies around the world. Virus neutralization and epidemiological efficacy drop obtained for several vaccines against the B.1.1.7, B.1.351 P.1, and B.1.617 genotypes are of concern. There is a growing number of reports on mutations in receptor-binding domain (RBD) increasing the transmissibility of the virus and escaping the neutralizing effect of antibodies. The Sputnik V vaccine is currently approved for use in more than 66 countries but its activity against variants of concern (VOC) is not extensively studied yet. Virus-neutralizing activity (VNA) of sera obtained from people vaccinated with Sputnik V in relation to internationally relevant genetic lineages B.1.1.7, B.1.351, P.1, B.1.617.2, B.1.617.3 and Moscow endemic variants B.1.1.141 (T385I) and B.1.1.317 (S477N, A522S) with mutations in the RBD domain has been assessed. The data obtained indicate no significant differences in VNA against B.1.1.7, B.1.617.3 and local genetic lineages B.1.1.141 (T385I), B.1.1.317 (S477N, A522S) with RBD mutations. For the B.1.351, P.1, and B.1.617.2 statistically significant 3.1-, 2.8-, and 2.5-fold, respectively, VNA reduction was observed. Notably, this decrease is lower than that reported in publications for other vaccines. However, a direct comparative study is necessary for a conclusion. Thus, sera from “Sputnik V”-vaccinated retain neutralizing activity against VOC B.1.1.7, B.1.351, P.1, B.1.617.2, B.1.617.3 as well as local genetic lineages B.1.1.141 and B.1.1.317 circulating in Moscow.
1. Introduction
The recent successful launch of SARS-CoV-2 vaccines gives hope for an early reduction of the pandemic and a return to the pre-quarantine living conditions [1,2,3,4,5]. All major vaccines ensure a convincing level of protection (over 90%) in the short term and reliable protection against the severe course of COVID-19 according to the clinical trials results. For countries leading the universal immunization program, the downward trend in disease incidence and mortality is evident [6]. The statistics data for Israel, the UAE, the USA, and the UK show a sharp decline in morbidity and mortality from COVID-19 after reaching 30 doses per 100 people [7]. It is not clear how a similar level of protection for widely used vaccines can be maintained for new SARS-CoV-2 strains with mutations in the SARS-CoV-2 Spike (S; envelope glycoprotein). Since most vaccines include Spike as a principal immunogen, its variability surveillance can timely inform on the risks of escape from neutralizing antibodies formed by vaccination.
Currently, over a million of SARS-CoV-2 genomic sequences are available on the GISAID server [8]. Individual virus variants with more pronounced epidemiological, immunological, or pathogenic properties, are of concern. At the beginning of 2021, the list of variants of concern (VOC) included the B.1.1.7, B.1.351, P.1; currently, this list already contains ten records including linages B.1.617.1, B.1.617.2, B.1.617.3 [9]. For some VOC, identical mutations in S proteins appear independently, requiring in-depth research into their effects on transmissibility, severity, and ability to overcome immunity formed in convalescents and vaccinated.
Active study of the composition of the mutations that have been accumulating recently in S protein shows that most of them increase interaction with the host’s ACE2 receptor [10]. The neutralizing effect of serum samples obtained from patients vaccinated with Pfizer/BNT162b2 was reduced for the B.1.351, B.1.1.28, and B.1.617 variants by 7.85, 5.12, and 3 times, respectively, in comparison to the wild-type virus [11,12]. Assessment of individual mutation contributions shows the major impact of the E484K mutation [11,13]. A comparative study of the decrease in neutralizing activity for serum samples obtained from the patients vaccinated with Moderna/mRNA-1273 and those vaccinated with Pfizer/BNT162b2 showed 20- and 40-fold decrease respectively against B.1.351 [14]. In fact, the cross-neutralization of the B.1.351 variant was comparable to SARS-CoV-1 and Bat SL-CoV-WIV1, suggesting that a relatively small number of Spike mutations may result in the escape from neutralizing antibodies. It is becoming apparent that mutations in RBD can pose the greatest risk, both of making SARS-CoV-2 more contagious and of reducing antibody neutralization. These mutations are likely to include K417N, L452R, E484K, S494P and N501Y/T, based on molecular dynamics data [15].
We have previously developed and tested the Sputnik V vaccine, which forms the high titers of neutralizing antibodies and a profound cell immune response [5]. The protective effectiveness of the vaccine was 91.6% as assessed by the results of phase III clinical trials conducted in Russia. Sputnik V vaccine is currently available for use in more than sixty-two countries. Tens of millions of people received the vaccine in Russia and around the world. This study was aimed to investigate the virus-neutralizing activity of sera for “Sputnik V”-vaccinated against VOC (B.1.1.7, B.1.351, P.1 and B.1.617) as well as dominant genetic lineages in Moscow with substitutions in the RBD.
2. Materials and Methods
2.1. Analysis of SARS-CoV-2 Genetic Diversity in Russia
We downloaded all available metadata from GISAID (accessed on 16 April 2021) querying keyword “Russia” in the Location field. The dataset was filtered as follows: 8 sequences were removed due to the incomplete sample collection date, 3 sequences—due to the sample collection date in March 2021 in order to avoid skewing the relative frequencies of genotypes and mutations during that month, and 25 sequences—due to the missing genotype information. Amino acid substitution frequencies were analyzed from the corresponding column of the metadata with Pandas library v.1.2.1 and Matplotlib library v.3.3.3 in Python v.3.7.8 using one-hot coded mutations and calculated means on monthly resampled data. Mutations spanning 319 to 541 positions of Spike were considered as mutations in RBD.
2.2. Sampling and Identification of SARS-CoV-2
Sequencing of SARS-CoV-2 Moscow diversity was carried out in a frame of collaboration with Moscow City Infectious Disease Clinical Hospital No.1 Moscow Healthcare Department. The study was approved by the ethics committee (the Local Ethics Committee Protocol No. 2a of 11 May 2020, No. 11a of 16 November 2020, and No. 1 of 11 February 2021). Nasopharyngeal swab was collected from the patients involved in the study for further examination by quantitative reverse transcription PCR. SARS-CoV-2 RNA was identified in the samples using a reagent kit for extraction and qualitative determination of SARS-CoV-2 coronavirus RNA using the SARS-CoV-2 FRT RT-PCR method, manufactured by Gamaleya National Research Institute of Epidemiology and Microbiology. Virus isolation and sequencing were carried out in separate aliquots.
2.3. Cell Lines and Viruses
Vero E6 (ATCC CRL-1586), 293T, and 293T/ACE2[16] cells were maintained in complete Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM), containing 10% fetal bovine serum (FBS, HyClone|Cytiva, Logan, UT, USA), L-glutamine (4 mM) and penicillin/streptomycin solution (100 IU/mL; 100 μg/mL) (PanEco, Moscow, Russia).
SARS-CoV-2 strains B.1.1.1 or PMVL-1 (GISAID EPI_ISL_421275), B.1.1.141 (T385I) or PMVL-31 (GISAID EPI_ISL_1710849) and B.1.1.317 (S477N, A522S) or PMVL-43 (GISAID EPI_ISL_1710861), B.1.617.2 (T19R G142D E156G F157del R158del L452R T478K D614G P681R D950N) and B.1.617.3 (T19R G142D E156G F157del R158del L452R E484Q D614G P681R D950N) were isolated from a nasopharyngeal swab. 293T/ACE2 or Vero E6 cells were used for isolation and initial passage. SARS-CoV-2 were propagated and titrated on Vero E6 cells. B.1.1.7(hCoV-19/Netherlands/NoordHolland_20432/2020, VOC 202012/01) and B.1.1.28/P.1(hCoV-19/Netherlands/NoordHolland_10915/2021) were obtained from EVAg collection. Viral titers were determined as TCID50 by endpoint dilution assay. Experiments with live SARS-CoV-2 followed the approved standard operating procedures of our biosafety level 3 facility (BSL-3).
2.4. Full Genome Viral Sequencing
After two passages on 293T/ACE2, clarified cell supernatants of isolated viruses were used to determine full viral genome sequences. An extraction of total RNA with ExtractRNA Reagent (Eurogen, Moscow, Russia) was performed according to the manufacturer’s instructions. Viral RNA was fragmented and reverse transcribed using random hexamer primers with RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit (ThermoFisher Scientific), followed by dsDNA synthesis using NEBNext Ultra II Non-Directional RNA Second Strand Synthesis Module (NEB). DNA libraries were constructed using NEBNext Fast DNA Library Prep Set for Ion Torrent (NEB) and sequenced using Ion 530 Chip, IonChef instrument and IonTorrent S5XL sequencer (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA). Raw reads were quality controlled with vsearch v2.14.2, mapped on the reference Wuhan-Hu-1 sequence (GenBank accession NC_045512.2) with BWA v0.7.17. Consensus sequences were produced using FreeBayes v1.3.2, bcftools v1.9, and bedtools v2.29.2.
2.5. RBD Fragment Sequencing
Total RNA was extracted from patient swabs and/or SARS-CoV-2 isolates using the RIBO Prep Kit (FBSI Central Research Institute of Epidemiology of Rospotrebnadzor, Moscow, Russia) according to the manufacturer’s instructions. Amplification was performed using a one-step RT-PCR method based on a reaction mixture containing (for one reaction) 10 pmol of each primer (the forward primer 5′-AACTTTAGAGTCCAACCAACAGAA-3′ and the reverse primer 5′-TGAAGTTGAAATTGACACATTTG-3′), 0.025 mM of each dNTP (Eurogen, Moscow, Russia), and 5 μL of 5X buffer (Eurogen, Moscow, Russia), 200 units of M-MLV reverse transcriptase, 10 units of Taq polymerase, and 10 μL of RNA (appr. 0.5 µg). Oligonucleotides make it possible to obtain an amplicon covering 334- to 529-amino acid positions of the spike-glycoprotein. Amplification was performed on a T100™ Thermal Cycler (Bio-Rad, Hercules, CA, USA). The conditions of the one-step RT-PCR reaction are as follows: 50 °C for 60 min, 95 °C for 5 min, then 35 cycles at 95 °C for 15 s, 55 °C for 10 s and 72 °C for 30 s, then 72 °C for 5 min. The amplification products were purified using ExoSAP-IT™ PCR Product Cleanup Reagent (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) and the concentration was measured using the Qubit Fluorometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). The obtained fragments were sequenced using the genetic analyzer Applied Biosystems 3500 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). The Unipro UGENE v37.0 program was used to analyze the chromatograms of the obtained sequences. Resulting FASTA files were analyzed in Nextclade web-service [17] for the presence of amino acid substitutions, corresponding CSV file was downloaded and analyzed similarly to the GISAID data.
2.6. Neutralization Assay with Live SARS-CoV-2
Serum-neutralizing titers of vaccinated against wild-type SARS-CoV-2 variants were analyzed as described earlier [18]. Briefly, serum samples were inactivated by incubation at 56 °C for 30 min. Next, serum was serially diluted in complete Dulbecco’s modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 2% fetal bovine serum (FBS) with starting sample dilution at 1:5 with two-fold dilution and mixed with 100 tissue culture infectious dose 50% (TCID50) corresponding SARS-CoV-2 at 1:1 ratio and incubated at 37 °C for 1 h. After that, serum-virus complexes were added to Vero E6 cell monolayer and incubated for 96 h. The cytopathic effect (CPE) of the virus on the cell was assessed visually. Neutralization titer was defined as the highest serum dilution without any CPE in two of three replicable wells.
Determination of NtAb titers was evaluated using the following SARS-CoV-2 variants: B.1.1.1 (PMVL-1, S: D614G; hCoV-19/Russia/Moscow_PMVL-1/2020), B.1.1.7 (hCoV-19/Netherlands/NoordHolland_20432/2020, VOC 202012/01), B.1.351 (hCoV-19/Russia/SPE-RII-27029S/2021), B.1.1.141 (PMVL-31, S: M153T, T385I, D614G; hCoV-19/Russia/MOW-PMVL-31/2020), B.1.1.317 (PMVL-43, S: D138Y, S477N, A522S, D614G, Q675R, A845S; hCoV-19/Russia/MOW-PMVL-43/2021), B.1.1.28/P.1 (hCoV-19/Netherlands/NoordHolland_10915/2021), B.1.617.2 (T19R G142D E156G F157del R158del L452R T478K D614G P681R D950N) and B.1.617.3 (T19R G142D E156G F157del R158del L452R E484Q D614G P681R D950N).
In the study of virus neutralization against wild variants of the SARS-CoV-2 virus, only the serum of vaccinated volunteers without COVID-19 in anamnesis were used. Serum was collected one month after vaccination (after dose 2). All volunteers signed informed consent. Total of 27 sera samples were used for determination of NtAb titer in a comparison study with B.1.1.1, B.1.1.7, B.1.351, B.1.1.141, B.1.1.317 variants and 16 sera samples—in study with B.1.1.1 and B.1.1.28 P.1, B.1.617.2 and B.1.617.3 variants due to the limited volume of 11 sera samples.
Statistical analysis was performed in GraphPad Prism version 9 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). For comparison of paired data, Wilcoxon test was used.
2.7. SARS-CoV-2 S Variant Pseudovirus Generation and Neutralization Assay
SARS-CoV-2 pseudotyped particles were produced by transfection of 293T cells using the Transporter 5 transfection reagent as described recently [19]. Briefly, 293T cells were transfected with a mixture 10 μg of pLVPG, 8 μg of pCMV-dR8.2, and 5 µg of pVAX-1-S Wuhan reference strain or pCG1-SARS-2-S bearing the lineages B.1.1.7 and B.1.351 (kindly provided by Dr. Thomas Schultz, Dr. Heino Wiese and Dr. Axel Haverich). Viral supernatants were collected at 72 h after transfection, filtered through a 0.45-μm filter and stored at −80 °C.
Virus neutralization assays were performed on 293T/ACE2 using SARS-CoV-2 spike pseudoviruses that expressed GFP. Pseudotyped virus was incubated with a serial two-fold dilution of human serum samples for 1 h at 37 °C. Then, pseudovirus-serum mixtures were transferred to 293T/ACE2 (1 × 104/well) cells in 96-wells plates. After incubation for 72 h in a 5% CO2 environment at 37 °C, GFP positive cells were counted using a Zeiss Axio Vert.A1 fluorescent microscope (Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany). Neutralization was calculated relative to virus-only controls. The half-maximal neutralization titers (NT50) for serum were determined using nonlinear regression with log (serum dilutions) vs. normalized response (GraphPad Prism).
3. Results
Since the beginning of the pandemic, the distribution of genetic lineages in the Russian Federation has notably changed [20,21,22]. In March 2020, the diversity was limited to a few genetic lineages, of which B.1 and B.1.1 were dominant (35.5% and 46.3% respectively). According to the GISAID data, the rate of emergence of new lineages increased during the second wave of pandemic, which began in Russia in September 2020 (Figure 1). Currently the dominant lineages consist of B.1.1, B.1.1.141, B.1.1.336, B.1.1.373 and particularly rising B.1.1.317 and B.1.1.397, which together accounted for 82.4% of the diversity in February 2021.
Vaccines 09 00779 g001 550Figure 1. SARS-CoV-2 genetic lineages distribution in Russia. Data were collected from GISAID and visualized to represent 20 most frequent lineages in Russia, PANGOLIN nomenclature.
We then focused on the most common RBD mutations and evaluated their combinations in the main genetic lineages. To rapidly explore the current repertoire of RBD mutations we have developed an in-house Sanger sequencing protocol to detect mutations in the RBD, covering 334–529 amino acid positions of S protein. This protocol was used to sequence 201 samples obtained from the Moscow Infectious Diseases Clinical Hospital patients during the May—June 2020 and November 2020—March 2021 time periods.
The RBD variability data obtained for SARS-CoV-2 variants from Moscow patients (Figure 2, dashed lines) are generally consistent with the variability data for Russian sequences available in GISAID (Figure 2, solid lines and Figure S1) showing increasing prevalence of S477N, A522S, E484K, N501Y, T385I, S494P, N439K, K417N, T487K, N501T, and Y508H mutations. The emergence of mutations in RBD is noted for B.1.1, B.1.1.141, B.1.1.294, B.1.1.317, and B.1.1.397 genetic lineages (Figure S2).
Vaccines 09 00779 g002 550Figure 2. Most common RBD mutations in Russian SARS-CoV-2 variants frequencies of individual mutations according to GISAID data (solid lines) and RBD fragment sequencing data obtained in the current study (dashed lines).
Considering the frequency of individual combinations of RBD mutations we have compiled a list of the most relevant variants (Table S1). Then, we examined B.1.1.7, B.1.351, and B.1.617, already present in Russia, as well as combinations of variants including B.1.1.317 (S477N, A522S) and B.1.1.141 (T385I) that we were able to isolate using cell culture. All these mutations were previously described in the scientific literature (Table S2). At the molecular level, the effects of these mutations tend to increase the interaction between the ACE2 receptor and RBD, and/or to reduce the antibodies-neutralizing effect. Although the assessment of VNA using a live virus provides the most reliable data and is the gold standard, for B.1.1.7 and B.1.351 we have further investigated the reduction of serum VNT using live virus and Spike-pseudotyped lentivirus. The live virus neutralization and Spike-pseudotyped lentivirus assays showed concordant results. The study of the neutralizing activity of Sputnik V induced sera against SARS-CoV-2 variants showed no significant differences in the levels of VNT for B.1.1.1, B.1.1.141 (T385I), B.1.1.317 (S477N, A522S), B.1.1.7, and B.1.617.3. About 3.1-, 2.8-, and 2.5-folds decrease in the VNT against B.1.351, P.1, and B.1.617.2 lineages, respectively, was observed (Figure 3).
Vaccines 09 00779 g003 550Figure 3. Serum neutralization titers against variants of SARS-CoV-2. The upper graphs show violin plots for serum samples, the lower graphs indicate the individual VNT changes. Geometric mean and 95% CI and p-value (Wilcoxon test) is noted on upper graphs. Number of used serum samples is noted on lower graphs.
4. Discussion
Epidemiological data are well consistent with the significant role of the ACE2 as an entry receptor. For example, the D614G mutation enhances binding affinity between RBD and ACE2 resulting in increased virus transmissibility [23]. The D614G variants now dominate in most countries worldwide [24]. Fortunately, the increased transmissibility of D614G variants is not associated with increased pathogenicity, nor with antibody-neutralization effects, due to its remoteness from RBD fragment [23]. A slightly more concerning mutation is N439K [25]. Similar to D614G this mutation leads to enhanced binding affinity between RBD and ACE2 but provides resistance to some monoclonal antibodies and eludes some polyclonal responses [25].
Since neither D614G nor N439K has shown the ability to increase the severity of the disease or to escape from neutralizing antibodies, the genetic lineages with these mutations are not classified as VOC. However, the variants of VOC are characterized by RBD mutations, which in turn alter the ACE2 interaction, and diminish the neutralizing antibodies activity.
The most discussed VOC in academic literature and media are Alpha (lineage B.1.1.7), Beta (lineage B.1.351), Gamma (lineage P.1), and Delta (lineage B.1.617.2) and initially found in United Kingdom, South Africa, Brazilia, and India, respectively. The B.1.1.7 lineage was discovered in Kent (UK) in late 2020. There are 23 mutations in the genome B.1.1.7, including a mutation in RBD N501Y, which increases the affinity of binding ACE2 receptor [26]. The spread of the B.1.1.7 lineage was insufficiently constrained by the UK-enforced anti-epidemic measures compared to other genetic variants [27], probably due to a higher basic reproductive number (R0) that increased from 0.4 to 0.7 [28]. There is evidence that B.1.1.7 variants increased lethality [29] and moderate escape from the antibody-neutralizing effects [30,31,32]. This lineage is already dominant in the UK and is widely spread throughout Europe and the United States [28,33,34].
The VNA against B.1.1.7 variant showed 2.1-fold reduction for the AstraZeneca ChAdOx1 nCoV-19 vaccine after 28 days following the second dose compared to SARS-CoV-2 Victoria strain. In a similar study sera VNA levels induced with the Pfizer-BioNTech vaccine BNT162b2 were reduced by 3.3 times [32]. In another study, AstraZeneca vaccine showed nine times VNA reduction in a live virus assay, while the epidemiological decrease of vaccine efficacy was insignificant (not exceeding 11%) [35].
The first case of B.1.1.7 in Russia was officially registered on January 10, 2021, reaching the frequency of 17.4% in March 2021 [36]. In our study, the decrease in VNA efficacy against B.1.1.7 variant for sera of people vaccinated with Sputnik V in both live virus (Figure 3) and Spike-pseudotyped lentiviruses assays (Figure S4) was statistically insignificant. These results demonstrate the high efficacy of the Sputnik V vaccine against the UK variant B.1.1.7, which is actively spreading in Europe, America, and, putatively, Russia.
Recently emerged Delta variant B.1.617 seems to be polymorphic and consists of B.1.617.1, B.1.617.2, and B.1.617.3 [9]. Among these variants B.1.617.2 only has VOC status (VOC-21APR-02). We isolated two variants B.1.617.2 (S: T19R G142D E156G F157del R158del L452R T478K D614G P681R D950N) and B.1.617.3 (S: T19R G142D E156G F157del R158del L452R E484Q D614G P681R D950N). Two mutations of RBD including T478K and E484Q differentiate these variants from each other. Our study reveals that antibody evasion of B.1.617.2 (2.5 VNT decrease) may contribute to the rapid spread of this variant in India and around the world.
The B.1.351 lineage is of much greater concern [37]. This lineage was discovered in South Africa during the first pandemic wave in the heavily affected metropolis (Nelson Mandela Bay) located on the coast of the Eastern Cape province. This genetic lineage spread rapidly and became dominant in the Eastern Cape, Western Cape, and KwaZulu-Natal provinces within several weeks. The available genomic data indicate the rapid spread of this lineage and the displacement of other virus lineages in several regions. This lineage is characterized by eight mutations in S protein, including three substitutions in the RBD (K417N, E484K, and N501Y) resulting in increased transmissibility [37] and immune escape [38]. The separate contribution of these individual mutations was already described [39,40]. Specifically, N501Y is a well-known mutation of the UK strain B.1.1.7 that can increase interaction with ACE2 and contribute to the partial escape from the neutralizing effect of antibodies. For the K417N mutation, a positive effect on the interaction with ACE2 and a weakened interaction with the neutralizing antibody STE90-C11 were shown [40]. The K417N mutation shows a more pronounced effect in combination with N501Y [40] further amplified by the E484K mutation [41,42]. The E484K mutation is currently found in VOC B.1.351, P.1, P.2, and in the newly emerged Alpha strain B.1.1.7 with an additional E484K mutation. A comparative study showed a 20- and 40-fold decrease in viral-neutralizing activity against B.1.351 by sera obtained from the people vaccinated with Moderna/mRNA-1273 and Pfizer/BNT162b2 vaccines, respectively [14]. In the cases of P.1 widely spread in Latin America and Southeast Asia, the reduction in serum neutralization is 4.5 for Moderna/mRNA-1273 and 6.7 for Pfizer/BNT162b2, respectively.
In our study, a three-fold decrease in the viral-neutralizing activity of B.1.351 variant was recorded for sera of the patients vaccinated with Sputnik V for Spike-pseudotyped lentivirus (Figure S4) and a 3.1-fold decrease for a live viral isolate (Figure 3), 2.8-fold decrease was recorded for P.1 variant. The decreased neutralization effect is observed most prominently for weakly reactive serums. Thus, maintaining high titers of antibodies as a result of Sputnik V vaccination or subsequent revaccinations can be one of the solutions to provide high virus-neutralizing activity against VOC B.1.351, P.1, B.1.617.2, and other emerging variants. The results obtained in the current study for Sputnik V compare favorably with the results of other prophylactic vaccines, although direct comparisons are not possible due to the absence of the unified methodology for assessing the virus-neutralizing effect. Single cases of local B.1.351 variant transmissions have been reported in Russia since March 16 [43]. It is noteworthy that, except for B.1.351 has not yet become widespread on other continents, and only imported cases and isolated local transmissions are currently recorded [44]. It is not clear to what extent we can expect this lineage to spread along other continents. The low incidence rate can be attributed both to the insufficient time that has elapsed since the emergence of the B.1.351 lineage, and/or the difficulty of this lineage competing with those already circulating in other continents. It is possible that the competitive advantage can only fully manifest itself after achieving a high percentage of immune people, considering the efficacy at which B.1.351 escapes the neutralizing immune response.
The epidemiologic efficacy of AstraZeneca ChAdOx1 nCoV-19 vaccine against B.1.351 variant was only 10.4% (95% CI, −76.8 to 54.8) [44,45]. It is worth noting that this efficacy is specified for mild to moderate cases of the disease. The protective efficacy of ChAdOx1 nCoV-19 against severe disease is currently unknown. For Novovax recombinant vaccine and Janssen adenovirus vaccine, the epidemiological efficacy in South Africa, where genotype B 1.351 is dominant, was 60% and 57%, respectively [38]. The records for the Janssen vaccine were mostly made for severe disease cases. Probably, most of the vaccines will reduce the preventive effect in the cases of mild disease, though they will retain the preventive effect against cases of severe disease. The problems of recording methodology do not allow for direct comparisons of the epidemiological vaccine performance.
It becomes obvious that under conditions of increasing herd immunity developed as a result of the past disease and vaccination, the number of SARS-CoV-2 variants with mutations in RBD and S protein will rapidly increase. Some of the mutation variants occur independently in different genetic lineages, i.e., N439K [25] or the E484K mutation [9]. In our study, in addition to the emergence of expected VOC in Russia, we studied the diversity of local genetic lineages with mutations in the RBD. A significant percentage of the substitution variants that are becoming common is recorded: S477N + A522S (27.8%), N501Y (4.73%), E484K (3.55%), T385I (2.37%), E484K + S494P (1.77%), N439K (1.18%), Y508H (0.59%), T478K (0.59%), S477N (0.59%), N501T (0.59%). These data are in concordance with previously reported analysis for Russia where S477N, A522S, T385I, and E484K mutation rates were found extensively increasing according to GISAID [10]. All these mutations were already reported as increasing the affinity for ACE2 receptor and/or decreasing the antibody-neutralizing effect (Table S1). We assessed the virus-neutralizing effect of serum in the patients vaccinated with Sputnik V based on live virus isolates, which showed a non-significant decrease in the antibody-neutralizing effect against B.1.1.397 (T385I) and B.1.1.317 (S477N, A522S).
Virus-neutralizing activity assay protocol used in the current study was previously validated in 1–3 phases of the Sputnik V vaccine clinical trials thus making it possible to directly compare the obtained results with the previous data [1,18].
The virus-neutralizing serum activity is a dynamic parameter. Booster immunization with a second dose is used to increase the number of antibodies and prolong their protective period of action. In case of the Sputnik V, a heterologous prime-booster scheme implementing different vector adenoviruses allows the use of a booster dose as soon as 21 days after the first immunization. In this case, antibodies formed against the adenovirus carrier do not interfere with the boosting effect.
Summarizing the obtained data, we can conclude that for the B.1.1.7, B.1.617.3, and local Moscow variants of genetic lineages B.1.1.141 (T385I) and B.1.1.317 (S477N, A522S) neutralizing properties of Sputnik V induced sera are not changed. For the B.1.351, P.1, and B.1.617.2 VOCs statistically significant 3.1-, 2.8-, and 2.5-fold, respectively, VNA reduction was observed. Notably decrease in VNT to VOC (B.1.351, P.1, B.1.617.2) in Sputnik V vaccinated sera is not as significant as for other vaccines described above. However, in order to make a final conclusion, it is necessary to conduct a direct comparative study. The decreased neutralization effect is of concern and requires further surveillance and epidemiological studies.
5. Conclusions
The data obtained indicate no significant differences in VNA against B.1.1.7, B.1.617.3, and local genetic lineages B.1.1.141 (T385I), B.1.1.317 (S477N, A522S) with RBD mutations. For the B.1.351, P.1, and B.1.617.2 statistically significant 3.1-, 2.8-, and 2.5-fold, respectively, VNA reduction was observed. Notably, this decrease is lower than reported in publications for other vaccines. However, a direct comparative study is necessary for a final conclusion.
Supplementary Materials
The following are available online at https://www.mdpi.com/article/10.3390/vaccines9070779/s1, Figure S1: Prevalence of RBD mutations in Russian SARS-CoV-2 variants collected since 2021, Figure S2: RBD mutations profiles of the major Russian SARS-CoV-2 genetic lineages, Figure S3: Correlation matrix of co-presence of mutations in the RBD, Figure S4: Neutralization activity of serum samples after two doses of the Sputnik V vaccine recipients against wild-type pseudo-SARS-CoV-2 and B.1.1.7 or B.1.351 spike mutant viruses, Table S1: The most common mutations in the RBD as reported in this study, Table S2: Putative phenotypic effect of dominating RBD mutations, Table S3: Characteristics of volunteers’ sera used in the study of VNA in a pseudovirus model, Table S4: The 50% serum neutralization titers against SARS-CoV-2 pseudoviruses.
Author Contributions
Conceptualization, D.Y.L., V.A.G. and I.V.D.; methodology, A.M.S., A.S.O., A.A.P., O.L.V., N.N.R., E.I.A., M.S.K., I.V.D., A.M.S., A.S.O., A.E.S., M.A.N., A.A.P., E.V.S., N.A.K., A.A.I., A.V.K. (Anna V. Kovyrshina), A.V.K. (Aleksandra V. Kuzina), D.M.G., A.B.K. and A.G.B.; formal analysis, A.P.T., O.A.B., L.V.K., A.I.T., D.V.S., O.V.Z., O.V.K., D.A.L., D.M.D., A.B.K.; investigation A.M.S., A.S.O., A.A.P., O.L.V., N.N.R., E.I.A., M.S.K., I.V.D., A.E.S., M.A.N., A.A.P., E.V.S., N.A.K. and A.G.B.; resources, D.Y.L., V.A.G., A.P.T., and A.L.G.; data curation A.A.P., I.V.D., A.M.S.; writing—original draft preparation, V.A.G.; writing—review and editing, V.A.G., I.V.D., A.M.S., A.I.T., D.V.S. and D.Y.L.; visualization, I.V.D., A.M.S., A.E.S. and M.A.N.; supervision, D.Y.L., V.A.G. and I.V.D.; project administration, V.A.G. and I.V.D.; funding acquisition, A.L.G. All authors have read and agreed to the published version of the manuscript.
Funding
Ministry of Health of Russia and Russian Direct Investment Fund.
Institutional Review Board Statement
The study was conducted according to the guidelines of the Declaration of Helsinki, and approved by the Local Ethics Committee Protocol No. 2a of 11 May 2020 and No. 11a of 16 November 2020, and No. 1 of 11 February 2021.
Informed Consent Statement
Informed consent was obtained from all subjects involved in the study.
Data Availability Statement
The data presented in this study are available on request from the corresponding author.
Acknowledgments
We would like to thank the study participants, site research staff, and members of the trial management groups.
Conflicts of Interest
I.V.D., A.G.B., D.M.G., A.I.T., D.V.S., O.V.Z., D.Y.L. and A.L.G. report patents for a Sputnik V immunobiological expression vector, pharmaceutical agent, and its method of use to prevent COVID-19. All other authors declare no competing interests.
https://www.mdpi.com/2076-393X/9/7/779/htm
by Vladimir A. Gushchin 1,2,*,†ORCID,Inna V. Dolzhikova 1,*,†ORCID,Alexey M. Shchetinin 1ORCID,Alina S. Odintsova 1ORCID,Andrei E. Siniavin 1,3ORCID,Maria A. Nikiforova 1ORCID,Andrei A. Pochtovyi 1,2ORCID,Elena V. Shidlovskaya 1,Nadezhda A. Kuznetsova 1,Olga A. Burgasova 1,4,5,Liudmila V. Kolobukhina 1,4ORCID,Anna A. Iliukhina 1,Anna V. Kovyrshina 1,Andrey G. Botikov 1,Aleksandra V. Kuzina 1,Daria M. Grousova 1,Amir I. Tukhvatulin 1ORCID,Dmitry V. Shcheblyakov 1ORCID,Olga V. Zubkova 1,Oksana V. Karpova 4,Olga L. Voronina 1ORCID,Natalia N. Ryzhova 1,Ekaterina I. Aksenova 1ORCID,Marina S. Kunda 1,Dmitry A. Lioznov 6,7,Daria M. Danilenko 6ORCID,Andrey B. Komissarov 6ORCID,Artem P. Tkachuck 1,Denis Y. Logunov 1,*,† andAlexander L. Gintsburg 1
Abstract
Since the beginning of the 2021 year, all the main six vaccines against COVID-19 have been used in mass vaccination companies around the world. Virus neutralization and epidemiological efficacy drop obtained for several vaccines against the B.1.1.7, B.1.351 P.1, and B.1.617 genotypes are of concern. There is a growing number of reports on mutations in receptor-binding domain (RBD) increasing the transmissibility of the virus and escaping the neutralizing effect of antibodies. The Sputnik V vaccine is currently approved for use in more than 66 countries but its activity against variants of concern (VOC) is not extensively studied yet. Virus-neutralizing activity (VNA) of sera obtained from people vaccinated with Sputnik V in relation to internationally relevant genetic lineages B.1.1.7, B.1.351, P.1, B.1.617.2, B.1.617.3 and Moscow endemic variants B.1.1.141 (T385I) and B.1.1.317 (S477N, A522S) with mutations in the RBD domain has been assessed. The data obtained indicate no significant differences in VNA against B.1.1.7, B.1.617.3 and local genetic lineages B.1.1.141 (T385I), B.1.1.317 (S477N, A522S) with RBD mutations. For the B.1.351, P.1, and B.1.617.2 statistically significant 3.1-, 2.8-, and 2.5-fold, respectively, VNA reduction was observed. Notably, this decrease is lower than that reported in publications for other vaccines. However, a direct comparative study is necessary for a conclusion. Thus, sera from “Sputnik V”-vaccinated retain neutralizing activity against VOC B.1.1.7, B.1.351, P.1, B.1.617.2, B.1.617.3 as well as local genetic lineages B.1.1.141 and B.1.1.317 circulating in Moscow.
1. Introduction
The recent successful launch of SARS-CoV-2 vaccines gives hope for an early reduction of the pandemic and a return to the pre-quarantine living conditions [1,2,3,4,5]. All major vaccines ensure a convincing level of protection (over 90%) in the short term and reliable protection against the severe course of COVID-19 according to the clinical trials results. For countries leading the universal immunization program, the downward trend in disease incidence and mortality is evident [6]. The statistics data for Israel, the UAE, the USA, and the UK show a sharp decline in morbidity and mortality from COVID-19 after reaching 30 doses per 100 people [7]. It is not clear how a similar level of protection for widely used vaccines can be maintained for new SARS-CoV-2 strains with mutations in the SARS-CoV-2 Spike (S; envelope glycoprotein). Since most vaccines include Spike as a principal immunogen, its variability surveillance can timely inform on the risks of escape from neutralizing antibodies formed by vaccination.
Currently, over a million of SARS-CoV-2 genomic sequences are available on the GISAID server [8]. Individual virus variants with more pronounced epidemiological, immunological, or pathogenic properties, are of concern. At the beginning of 2021, the list of variants of concern (VOC) included the B.1.1.7, B.1.351, P.1; currently, this list already contains ten records including linages B.1.617.1, B.1.617.2, B.1.617.3 [9]. For some VOC, identical mutations in S proteins appear independently, requiring in-depth research into their effects on transmissibility, severity, and ability to overcome immunity formed in convalescents and vaccinated.
Active study of the composition of the mutations that have been accumulating recently in S protein shows that most of them increase interaction with the host’s ACE2 receptor [10]. The neutralizing effect of serum samples obtained from patients vaccinated with Pfizer/BNT162b2 was reduced for the B.1.351, B.1.1.28, and B.1.617 variants by 7.85, 5.12, and 3 times, respectively, in comparison to the wild-type virus [11,12]. Assessment of individual mutation contributions shows the major impact of the E484K mutation [11,13]. A comparative study of the decrease in neutralizing activity for serum samples obtained from the patients vaccinated with Moderna/mRNA-1273 and those vaccinated with Pfizer/BNT162b2 showed 20- and 40-fold decrease respectively against B.1.351 [14]. In fact, the cross-neutralization of the B.1.351 variant was comparable to SARS-CoV-1 and Bat SL-CoV-WIV1, suggesting that a relatively small number of Spike mutations may result in the escape from neutralizing antibodies. It is becoming apparent that mutations in RBD can pose the greatest risk, both of making SARS-CoV-2 more contagious and of reducing antibody neutralization. These mutations are likely to include K417N, L452R, E484K, S494P and N501Y/T, based on molecular dynamics data [15].
We have previously developed and tested the Sputnik V vaccine, which forms the high titers of neutralizing antibodies and a profound cell immune response [5]. The protective effectiveness of the vaccine was 91.6% as assessed by the results of phase III clinical trials conducted in Russia. Sputnik V vaccine is currently available for use in more than sixty-two countries. Tens of millions of people received the vaccine in Russia and around the world. This study was aimed to investigate the virus-neutralizing activity of sera for “Sputnik V”-vaccinated against VOC (B.1.1.7, B.1.351, P.1 and B.1.617) as well as dominant genetic lineages in Moscow with substitutions in the RBD.
2. Materials and Methods
2.1. Analysis of SARS-CoV-2 Genetic Diversity in Russia
We downloaded all available metadata from GISAID (accessed on 16 April 2021) querying keyword “Russia” in the Location field. The dataset was filtered as follows: 8 sequences were removed due to the incomplete sample collection date, 3 sequences—due to the sample collection date in March 2021 in order to avoid skewing the relative frequencies of genotypes and mutations during that month, and 25 sequences—due to the missing genotype information. Amino acid substitution frequencies were analyzed from the corresponding column of the metadata with Pandas library v.1.2.1 and Matplotlib library v.3.3.3 in Python v.3.7.8 using one-hot coded mutations and calculated means on monthly resampled data. Mutations spanning 319 to 541 positions of Spike were considered as mutations in RBD.
2.2. Sampling and Identification of SARS-CoV-2
Sequencing of SARS-CoV-2 Moscow diversity was carried out in a frame of collaboration with Moscow City Infectious Disease Clinical Hospital No.1 Moscow Healthcare Department. The study was approved by the ethics committee (the Local Ethics Committee Protocol No. 2a of 11 May 2020, No. 11a of 16 November 2020, and No. 1 of 11 February 2021). Nasopharyngeal swab was collected from the patients involved in the study for further examination by quantitative reverse transcription PCR. SARS-CoV-2 RNA was identified in the samples using a reagent kit for extraction and qualitative determination of SARS-CoV-2 coronavirus RNA using the SARS-CoV-2 FRT RT-PCR method, manufactured by Gamaleya National Research Institute of Epidemiology and Microbiology. Virus isolation and sequencing were carried out in separate aliquots.
2.3. Cell Lines and Viruses
Vero E6 (ATCC CRL-1586), 293T, and 293T/ACE2[16] cells were maintained in complete Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM), containing 10% fetal bovine serum (FBS, HyClone|Cytiva, Logan, UT, USA), L-glutamine (4 mM) and penicillin/streptomycin solution (100 IU/mL; 100 μg/mL) (PanEco, Moscow, Russia).
SARS-CoV-2 strains B.1.1.1 or PMVL-1 (GISAID EPI_ISL_421275), B.1.1.141 (T385I) or PMVL-31 (GISAID EPI_ISL_1710849) and B.1.1.317 (S477N, A522S) or PMVL-43 (GISAID EPI_ISL_1710861), B.1.617.2 (T19R G142D E156G F157del R158del L452R T478K D614G P681R D950N) and B.1.617.3 (T19R G142D E156G F157del R158del L452R E484Q D614G P681R D950N) were isolated from a nasopharyngeal swab. 293T/ACE2 or Vero E6 cells were used for isolation and initial passage. SARS-CoV-2 were propagated and titrated on Vero E6 cells. B.1.1.7(hCoV-19/Netherlands/NoordHolland_20432/2020, VOC 202012/01) and B.1.1.28/P.1(hCoV-19/Netherlands/NoordHolland_10915/2021) were obtained from EVAg collection. Viral titers were determined as TCID50 by endpoint dilution assay. Experiments with live SARS-CoV-2 followed the approved standard operating procedures of our biosafety level 3 facility (BSL-3).
2.4. Full Genome Viral Sequencing
After two passages on 293T/ACE2, clarified cell supernatants of isolated viruses were used to determine full viral genome sequences. An extraction of total RNA with ExtractRNA Reagent (Eurogen, Moscow, Russia) was performed according to the manufacturer’s instructions. Viral RNA was fragmented and reverse transcribed using random hexamer primers with RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit (ThermoFisher Scientific), followed by dsDNA synthesis using NEBNext Ultra II Non-Directional RNA Second Strand Synthesis Module (NEB). DNA libraries were constructed using NEBNext Fast DNA Library Prep Set for Ion Torrent (NEB) and sequenced using Ion 530 Chip, IonChef instrument and IonTorrent S5XL sequencer (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA). Raw reads were quality controlled with vsearch v2.14.2, mapped on the reference Wuhan-Hu-1 sequence (GenBank accession NC_045512.2) with BWA v0.7.17. Consensus sequences were produced using FreeBayes v1.3.2, bcftools v1.9, and bedtools v2.29.2.
2.5. RBD Fragment Sequencing
Total RNA was extracted from patient swabs and/or SARS-CoV-2 isolates using the RIBO Prep Kit (FBSI Central Research Institute of Epidemiology of Rospotrebnadzor, Moscow, Russia) according to the manufacturer’s instructions. Amplification was performed using a one-step RT-PCR method based on a reaction mixture containing (for one reaction) 10 pmol of each primer (the forward primer 5′-AACTTTAGAGTCCAACCAACAGAA-3′ and the reverse primer 5′-TGAAGTTGAAATTGACACATTTG-3′), 0.025 mM of each dNTP (Eurogen, Moscow, Russia), and 5 μL of 5X buffer (Eurogen, Moscow, Russia), 200 units of M-MLV reverse transcriptase, 10 units of Taq polymerase, and 10 μL of RNA (appr. 0.5 µg). Oligonucleotides make it possible to obtain an amplicon covering 334- to 529-amino acid positions of the spike-glycoprotein. Amplification was performed on a T100™ Thermal Cycler (Bio-Rad, Hercules, CA, USA). The conditions of the one-step RT-PCR reaction are as follows: 50 °C for 60 min, 95 °C for 5 min, then 35 cycles at 95 °C for 15 s, 55 °C for 10 s and 72 °C for 30 s, then 72 °C for 5 min. The amplification products were purified using ExoSAP-IT™ PCR Product Cleanup Reagent (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) and the concentration was measured using the Qubit Fluorometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). The obtained fragments were sequenced using the genetic analyzer Applied Biosystems 3500 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). The Unipro UGENE v37.0 program was used to analyze the chromatograms of the obtained sequences. Resulting FASTA files were analyzed in Nextclade web-service [17] for the presence of amino acid substitutions, corresponding CSV file was downloaded and analyzed similarly to the GISAID data.
2.6. Neutralization Assay with Live SARS-CoV-2
Serum-neutralizing titers of vaccinated against wild-type SARS-CoV-2 variants were analyzed as described earlier [18]. Briefly, serum samples were inactivated by incubation at 56 °C for 30 min. Next, serum was serially diluted in complete Dulbecco’s modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 2% fetal bovine serum (FBS) with starting sample dilution at 1:5 with two-fold dilution and mixed with 100 tissue culture infectious dose 50% (TCID50) corresponding SARS-CoV-2 at 1:1 ratio and incubated at 37 °C for 1 h. After that, serum-virus complexes were added to Vero E6 cell monolayer and incubated for 96 h. The cytopathic effect (CPE) of the virus on the cell was assessed visually. Neutralization titer was defined as the highest serum dilution without any CPE in two of three replicable wells.
Determination of NtAb titers was evaluated using the following SARS-CoV-2 variants: B.1.1.1 (PMVL-1, S: D614G; hCoV-19/Russia/Moscow_PMVL-1/2020), B.1.1.7 (hCoV-19/Netherlands/NoordHolland_20432/2020, VOC 202012/01), B.1.351 (hCoV-19/Russia/SPE-RII-27029S/2021), B.1.1.141 (PMVL-31, S: M153T, T385I, D614G; hCoV-19/Russia/MOW-PMVL-31/2020), B.1.1.317 (PMVL-43, S: D138Y, S477N, A522S, D614G, Q675R, A845S; hCoV-19/Russia/MOW-PMVL-43/2021), B.1.1.28/P.1 (hCoV-19/Netherlands/NoordHolland_10915/2021), B.1.617.2 (T19R G142D E156G F157del R158del L452R T478K D614G P681R D950N) and B.1.617.3 (T19R G142D E156G F157del R158del L452R E484Q D614G P681R D950N).
In the study of virus neutralization against wild variants of the SARS-CoV-2 virus, only the serum of vaccinated volunteers without COVID-19 in anamnesis were used. Serum was collected one month after vaccination (after dose 2). All volunteers signed informed consent. Total of 27 sera samples were used for determination of NtAb titer in a comparison study with B.1.1.1, B.1.1.7, B.1.351, B.1.1.141, B.1.1.317 variants and 16 sera samples—in study with B.1.1.1 and B.1.1.28 P.1, B.1.617.2 and B.1.617.3 variants due to the limited volume of 11 sera samples.
Statistical analysis was performed in GraphPad Prism version 9 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). For comparison of paired data, Wilcoxon test was used.
2.7. SARS-CoV-2 S Variant Pseudovirus Generation and Neutralization Assay
SARS-CoV-2 pseudotyped particles were produced by transfection of 293T cells using the Transporter 5 transfection reagent as described recently [19]. Briefly, 293T cells were transfected with a mixture 10 μg of pLVPG, 8 μg of pCMV-dR8.2, and 5 µg of pVAX-1-S Wuhan reference strain or pCG1-SARS-2-S bearing the lineages B.1.1.7 and B.1.351 (kindly provided by Dr. Thomas Schultz, Dr. Heino Wiese and Dr. Axel Haverich). Viral supernatants were collected at 72 h after transfection, filtered through a 0.45-μm filter and stored at −80 °C.
Virus neutralization assays were performed on 293T/ACE2 using SARS-CoV-2 spike pseudoviruses that expressed GFP. Pseudotyped virus was incubated with a serial two-fold dilution of human serum samples for 1 h at 37 °C. Then, pseudovirus-serum mixtures were transferred to 293T/ACE2 (1 × 104/well) cells in 96-wells plates. After incubation for 72 h in a 5% CO2 environment at 37 °C, GFP positive cells were counted using a Zeiss Axio Vert.A1 fluorescent microscope (Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany). Neutralization was calculated relative to virus-only controls. The half-maximal neutralization titers (NT50) for serum were determined using nonlinear regression with log (serum dilutions) vs. normalized response (GraphPad Prism).
3. Results
Since the beginning of the pandemic, the distribution of genetic lineages in the Russian Federation has notably changed [20,21,22]. In March 2020, the diversity was limited to a few genetic lineages, of which B.1 and B.1.1 were dominant (35.5% and 46.3% respectively). According to the GISAID data, the rate of emergence of new lineages increased during the second wave of pandemic, which began in Russia in September 2020 (Figure 1). Currently the dominant lineages consist of B.1.1, B.1.1.141, B.1.1.336, B.1.1.373 and particularly rising B.1.1.317 and B.1.1.397, which together accounted for 82.4% of the diversity in February 2021.
Vaccines 09 00779 g001 550Figure 1. SARS-CoV-2 genetic lineages distribution in Russia. Data were collected from GISAID and visualized to represent 20 most frequent lineages in Russia, PANGOLIN nomenclature.
We then focused on the most common RBD mutations and evaluated their combinations in the main genetic lineages. To rapidly explore the current repertoire of RBD mutations we have developed an in-house Sanger sequencing protocol to detect mutations in the RBD, covering 334–529 amino acid positions of S protein. This protocol was used to sequence 201 samples obtained from the Moscow Infectious Diseases Clinical Hospital patients during the May—June 2020 and November 2020—March 2021 time periods.
The RBD variability data obtained for SARS-CoV-2 variants from Moscow patients (Figure 2, dashed lines) are generally consistent with the variability data for Russian sequences available in GISAID (Figure 2, solid lines and Figure S1) showing increasing prevalence of S477N, A522S, E484K, N501Y, T385I, S494P, N439K, K417N, T487K, N501T, and Y508H mutations. The emergence of mutations in RBD is noted for B.1.1, B.1.1.141, B.1.1.294, B.1.1.317, and B.1.1.397 genetic lineages (Figure S2).
Vaccines 09 00779 g002 550Figure 2. Most common RBD mutations in Russian SARS-CoV-2 variants frequencies of individual mutations according to GISAID data (solid lines) and RBD fragment sequencing data obtained in the current study (dashed lines).
Considering the frequency of individual combinations of RBD mutations we have compiled a list of the most relevant variants (Table S1). Then, we examined B.1.1.7, B.1.351, and B.1.617, already present in Russia, as well as combinations of variants including B.1.1.317 (S477N, A522S) and B.1.1.141 (T385I) that we were able to isolate using cell culture. All these mutations were previously described in the scientific literature (Table S2). At the molecular level, the effects of these mutations tend to increase the interaction between the ACE2 receptor and RBD, and/or to reduce the antibodies-neutralizing effect. Although the assessment of VNA using a live virus provides the most reliable data and is the gold standard, for B.1.1.7 and B.1.351 we have further investigated the reduction of serum VNT using live virus and Spike-pseudotyped lentivirus. The live virus neutralization and Spike-pseudotyped lentivirus assays showed concordant results. The study of the neutralizing activity of Sputnik V induced sera against SARS-CoV-2 variants showed no significant differences in the levels of VNT for B.1.1.1, B.1.1.141 (T385I), B.1.1.317 (S477N, A522S), B.1.1.7, and B.1.617.3. About 3.1-, 2.8-, and 2.5-folds decrease in the VNT against B.1.351, P.1, and B.1.617.2 lineages, respectively, was observed (Figure 3).
Vaccines 09 00779 g003 550Figure 3. Serum neutralization titers against variants of SARS-CoV-2. The upper graphs show violin plots for serum samples, the lower graphs indicate the individual VNT changes. Geometric mean and 95% CI and p-value (Wilcoxon test) is noted on upper graphs. Number of used serum samples is noted on lower graphs.
4. Discussion
Epidemiological data are well consistent with the significant role of the ACE2 as an entry receptor. For example, the D614G mutation enhances binding affinity between RBD and ACE2 resulting in increased virus transmissibility [23]. The D614G variants now dominate in most countries worldwide [24]. Fortunately, the increased transmissibility of D614G variants is not associated with increased pathogenicity, nor with antibody-neutralization effects, due to its remoteness from RBD fragment [23]. A slightly more concerning mutation is N439K [25]. Similar to D614G this mutation leads to enhanced binding affinity between RBD and ACE2 but provides resistance to some monoclonal antibodies and eludes some polyclonal responses [25].
Since neither D614G nor N439K has shown the ability to increase the severity of the disease or to escape from neutralizing antibodies, the genetic lineages with these mutations are not classified as VOC. However, the variants of VOC are characterized by RBD mutations, which in turn alter the ACE2 interaction, and diminish the neutralizing antibodies activity.
The most discussed VOC in academic literature and media are Alpha (lineage B.1.1.7), Beta (lineage B.1.351), Gamma (lineage P.1), and Delta (lineage B.1.617.2) and initially found in United Kingdom, South Africa, Brazilia, and India, respectively. The B.1.1.7 lineage was discovered in Kent (UK) in late 2020. There are 23 mutations in the genome B.1.1.7, including a mutation in RBD N501Y, which increases the affinity of binding ACE2 receptor [26]. The spread of the B.1.1.7 lineage was insufficiently constrained by the UK-enforced anti-epidemic measures compared to other genetic variants [27], probably due to a higher basic reproductive number (R0) that increased from 0.4 to 0.7 [28]. There is evidence that B.1.1.7 variants increased lethality [29] and moderate escape from the antibody-neutralizing effects [30,31,32]. This lineage is already dominant in the UK and is widely spread throughout Europe and the United States [28,33,34].
The VNA against B.1.1.7 variant showed 2.1-fold reduction for the AstraZeneca ChAdOx1 nCoV-19 vaccine after 28 days following the second dose compared to SARS-CoV-2 Victoria strain. In a similar study sera VNA levels induced with the Pfizer-BioNTech vaccine BNT162b2 were reduced by 3.3 times [32]. In another study, AstraZeneca vaccine showed nine times VNA reduction in a live virus assay, while the epidemiological decrease of vaccine efficacy was insignificant (not exceeding 11%) [35].
The first case of B.1.1.7 in Russia was officially registered on January 10, 2021, reaching the frequency of 17.4% in March 2021 [36]. In our study, the decrease in VNA efficacy against B.1.1.7 variant for sera of people vaccinated with Sputnik V in both live virus (Figure 3) and Spike-pseudotyped lentiviruses assays (Figure S4) was statistically insignificant. These results demonstrate the high efficacy of the Sputnik V vaccine against the UK variant B.1.1.7, which is actively spreading in Europe, America, and, putatively, Russia.
Recently emerged Delta variant B.1.617 seems to be polymorphic and consists of B.1.617.1, B.1.617.2, and B.1.617.3 [9]. Among these variants B.1.617.2 only has VOC status (VOC-21APR-02). We isolated two variants B.1.617.2 (S: T19R G142D E156G F157del R158del L452R T478K D614G P681R D950N) and B.1.617.3 (S: T19R G142D E156G F157del R158del L452R E484Q D614G P681R D950N). Two mutations of RBD including T478K and E484Q differentiate these variants from each other. Our study reveals that antibody evasion of B.1.617.2 (2.5 VNT decrease) may contribute to the rapid spread of this variant in India and around the world.
The B.1.351 lineage is of much greater concern [37]. This lineage was discovered in South Africa during the first pandemic wave in the heavily affected metropolis (Nelson Mandela Bay) located on the coast of the Eastern Cape province. This genetic lineage spread rapidly and became dominant in the Eastern Cape, Western Cape, and KwaZulu-Natal provinces within several weeks. The available genomic data indicate the rapid spread of this lineage and the displacement of other virus lineages in several regions. This lineage is characterized by eight mutations in S protein, including three substitutions in the RBD (K417N, E484K, and N501Y) resulting in increased transmissibility [37] and immune escape [38]. The separate contribution of these individual mutations was already described [39,40]. Specifically, N501Y is a well-known mutation of the UK strain B.1.1.7 that can increase interaction with ACE2 and contribute to the partial escape from the neutralizing effect of antibodies. For the K417N mutation, a positive effect on the interaction with ACE2 and a weakened interaction with the neutralizing antibody STE90-C11 were shown [40]. The K417N mutation shows a more pronounced effect in combination with N501Y [40] further amplified by the E484K mutation [41,42]. The E484K mutation is currently found in VOC B.1.351, P.1, P.2, and in the newly emerged Alpha strain B.1.1.7 with an additional E484K mutation. A comparative study showed a 20- and 40-fold decrease in viral-neutralizing activity against B.1.351 by sera obtained from the people vaccinated with Moderna/mRNA-1273 and Pfizer/BNT162b2 vaccines, respectively [14]. In the cases of P.1 widely spread in Latin America and Southeast Asia, the reduction in serum neutralization is 4.5 for Moderna/mRNA-1273 and 6.7 for Pfizer/BNT162b2, respectively.
In our study, a three-fold decrease in the viral-neutralizing activity of B.1.351 variant was recorded for sera of the patients vaccinated with Sputnik V for Spike-pseudotyped lentivirus (Figure S4) and a 3.1-fold decrease for a live viral isolate (Figure 3), 2.8-fold decrease was recorded for P.1 variant. The decreased neutralization effect is observed most prominently for weakly reactive serums. Thus, maintaining high titers of antibodies as a result of Sputnik V vaccination or subsequent revaccinations can be one of the solutions to provide high virus-neutralizing activity against VOC B.1.351, P.1, B.1.617.2, and other emerging variants. The results obtained in the current study for Sputnik V compare favorably with the results of other prophylactic vaccines, although direct comparisons are not possible due to the absence of the unified methodology for assessing the virus-neutralizing effect. Single cases of local B.1.351 variant transmissions have been reported in Russia since March 16 [43]. It is noteworthy that, except for B.1.351 has not yet become widespread on other continents, and only imported cases and isolated local transmissions are currently recorded [44]. It is not clear to what extent we can expect this lineage to spread along other continents. The low incidence rate can be attributed both to the insufficient time that has elapsed since the emergence of the B.1.351 lineage, and/or the difficulty of this lineage competing with those already circulating in other continents. It is possible that the competitive advantage can only fully manifest itself after achieving a high percentage of immune people, considering the efficacy at which B.1.351 escapes the neutralizing immune response.
The epidemiologic efficacy of AstraZeneca ChAdOx1 nCoV-19 vaccine against B.1.351 variant was only 10.4% (95% CI, −76.8 to 54.8) [44,45]. It is worth noting that this efficacy is specified for mild to moderate cases of the disease. The protective efficacy of ChAdOx1 nCoV-19 against severe disease is currently unknown. For Novovax recombinant vaccine and Janssen adenovirus vaccine, the epidemiological efficacy in South Africa, where genotype B 1.351 is dominant, was 60% and 57%, respectively [38]. The records for the Janssen vaccine were mostly made for severe disease cases. Probably, most of the vaccines will reduce the preventive effect in the cases of mild disease, though they will retain the preventive effect against cases of severe disease. The problems of recording methodology do not allow for direct comparisons of the epidemiological vaccine performance.
It becomes obvious that under conditions of increasing herd immunity developed as a result of the past disease and vaccination, the number of SARS-CoV-2 variants with mutations in RBD and S protein will rapidly increase. Some of the mutation variants occur independently in different genetic lineages, i.e., N439K [25] or the E484K mutation [9]. In our study, in addition to the emergence of expected VOC in Russia, we studied the diversity of local genetic lineages with mutations in the RBD. A significant percentage of the substitution variants that are becoming common is recorded: S477N + A522S (27.8%), N501Y (4.73%), E484K (3.55%), T385I (2.37%), E484K + S494P (1.77%), N439K (1.18%), Y508H (0.59%), T478K (0.59%), S477N (0.59%), N501T (0.59%). These data are in concordance with previously reported analysis for Russia where S477N, A522S, T385I, and E484K mutation rates were found extensively increasing according to GISAID [10]. All these mutations were already reported as increasing the affinity for ACE2 receptor and/or decreasing the antibody-neutralizing effect (Table S1). We assessed the virus-neutralizing effect of serum in the patients vaccinated with Sputnik V based on live virus isolates, which showed a non-significant decrease in the antibody-neutralizing effect against B.1.1.397 (T385I) and B.1.1.317 (S477N, A522S).
Virus-neutralizing activity assay protocol used in the current study was previously validated in 1–3 phases of the Sputnik V vaccine clinical trials thus making it possible to directly compare the obtained results with the previous data [1,18].
The virus-neutralizing serum activity is a dynamic parameter. Booster immunization with a second dose is used to increase the number of antibodies and prolong their protective period of action. In case of the Sputnik V, a heterologous prime-booster scheme implementing different vector adenoviruses allows the use of a booster dose as soon as 21 days after the first immunization. In this case, antibodies formed against the adenovirus carrier do not interfere with the boosting effect.
Summarizing the obtained data, we can conclude that for the B.1.1.7, B.1.617.3, and local Moscow variants of genetic lineages B.1.1.141 (T385I) and B.1.1.317 (S477N, A522S) neutralizing properties of Sputnik V induced sera are not changed. For the B.1.351, P.1, and B.1.617.2 VOCs statistically significant 3.1-, 2.8-, and 2.5-fold, respectively, VNA reduction was observed. Notably decrease in VNT to VOC (B.1.351, P.1, B.1.617.2) in Sputnik V vaccinated sera is not as significant as for other vaccines described above. However, in order to make a final conclusion, it is necessary to conduct a direct comparative study. The decreased neutralization effect is of concern and requires further surveillance and epidemiological studies.
5. Conclusions
The data obtained indicate no significant differences in VNA against B.1.1.7, B.1.617.3, and local genetic lineages B.1.1.141 (T385I), B.1.1.317 (S477N, A522S) with RBD mutations. For the B.1.351, P.1, and B.1.617.2 statistically significant 3.1-, 2.8-, and 2.5-fold, respectively, VNA reduction was observed. Notably, this decrease is lower than reported in publications for other vaccines. However, a direct comparative study is necessary for a final conclusion.
Supplementary Materials
The following are available online at https://www.mdpi.com/article/10.3390/vaccines9070779/s1, Figure S1: Prevalence of RBD mutations in Russian SARS-CoV-2 variants collected since 2021, Figure S2: RBD mutations profiles of the major Russian SARS-CoV-2 genetic lineages, Figure S3: Correlation matrix of co-presence of mutations in the RBD, Figure S4: Neutralization activity of serum samples after two doses of the Sputnik V vaccine recipients against wild-type pseudo-SARS-CoV-2 and B.1.1.7 or B.1.351 spike mutant viruses, Table S1: The most common mutations in the RBD as reported in this study, Table S2: Putative phenotypic effect of dominating RBD mutations, Table S3: Characteristics of volunteers’ sera used in the study of VNA in a pseudovirus model, Table S4: The 50% serum neutralization titers against SARS-CoV-2 pseudoviruses.
Author Contributions
Conceptualization, D.Y.L., V.A.G. and I.V.D.; methodology, A.M.S., A.S.O., A.A.P., O.L.V., N.N.R., E.I.A., M.S.K., I.V.D., A.M.S., A.S.O., A.E.S., M.A.N., A.A.P., E.V.S., N.A.K., A.A.I., A.V.K. (Anna V. Kovyrshina), A.V.K. (Aleksandra V. Kuzina), D.M.G., A.B.K. and A.G.B.; formal analysis, A.P.T., O.A.B., L.V.K., A.I.T., D.V.S., O.V.Z., O.V.K., D.A.L., D.M.D., A.B.K.; investigation A.M.S., A.S.O., A.A.P., O.L.V., N.N.R., E.I.A., M.S.K., I.V.D., A.E.S., M.A.N., A.A.P., E.V.S., N.A.K. and A.G.B.; resources, D.Y.L., V.A.G., A.P.T., and A.L.G.; data curation A.A.P., I.V.D., A.M.S.; writing—original draft preparation, V.A.G.; writing—review and editing, V.A.G., I.V.D., A.M.S., A.I.T., D.V.S. and D.Y.L.; visualization, I.V.D., A.M.S., A.E.S. and M.A.N.; supervision, D.Y.L., V.A.G. and I.V.D.; project administration, V.A.G. and I.V.D.; funding acquisition, A.L.G. All authors have read and agreed to the published version of the manuscript.
Funding
Ministry of Health of Russia and Russian Direct Investment Fund.
Institutional Review Board Statement
The study was conducted according to the guidelines of the Declaration of Helsinki, and approved by the Local Ethics Committee Protocol No. 2a of 11 May 2020 and No. 11a of 16 November 2020, and No. 1 of 11 February 2021.
Informed Consent Statement
Informed consent was obtained from all subjects involved in the study.
Data Availability Statement
The data presented in this study are available on request from the corresponding author.
Acknowledgments
We would like to thank the study participants, site research staff, and members of the trial management groups.
Conflicts of Interest
I.V.D., A.G.B., D.M.G., A.I.T., D.V.S., O.V.Z., D.Y.L. and A.L.G. report patents for a Sputnik V immunobiological expression vector, pharmaceutical agent, and its method of use to prevent COVID-19. All other authors declare no competing interests.
https://www.mdpi.com/2076-393X/9/7/779/htm
Но почему-то она делает их этого поразительный вывод:Нужно понимать, что вирусу тоже хочется жить. И если он «видит», что не может нас заразить, поскольку у нас есть антитела, которые его блокируют, то он будет мутировать, чтобы выживать. Он будет мутировать, чтобы заразить нас и размножиться.
Как эти две мысли уживаются в одной голове мне не понятно.Эту машину можно заблокировать, если добиться очень высокого уровня иммунной прослойки: если у нас будет порядка 80–90% людей с иммунитетом к вирусу SARS-CoV-2. Это переболевшие и вакцинированные. Без этого вирус не остановишь.
Верните каждому своё, пусть все идут своим путём, приобретя утраты. (С)
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
Никому не понятно)). И непонимание будет расти.Matryona писал(а): Как эти две мысли уживаются в одной голове мне не понятно.
Во -первых, слишком много источников различной информации и нет одного общего на который можно ссылаться и которому можно доверять - большой привет разрушенному советскому образованию - попробуй оспорь ВСЕ мнения в интернете).
Во -вторых, меня осенило буквально, слушаю этого воронежского дядьку про наших репрессированных писателей и поэтов и попутно он с цифрами рассказывает как советская "богема" "бедствовала", он сравнения даёт по зарплате других профессий. Так вот. В Союзе было огромное число инженеров, просто как собак нерезаных)). НО! Это особый стиль мышления - конструкторский, плюс сама система образования была и лево и право полушарная (сейчас вообще без полушарная, только животный мозг развивают))), то есть, обязательно и какое-то музыкальное образование было, как дополнительное или художественное и физическое развитие. В результате получались очень органично развитые мозги. Поэтому у нас так расцвело диссиденство в 70 -80х и поэтому было столько талантов, которые по всему миру в 90х разбежались. И всё это мы похерили благополучно, плюс атаки целенаправленные на такие вот мозги, которым надо доковыряться до всего и сложить по новому. И по результатам - шизофрения головного мозга - когда два взаимоисключающих факта уживаются в одной голове как причина и следствие. Главное иностранных слов побольше напихать в речь, чтобы окончательно запутать и галочку поставить себе - исполнено.
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
Вот так вот. Сидите дома - зарабатывайте себе агарофобию)).
Власти Москвы обсуждают введение «краткосрочного локдауна» с 30 октября по 7 ноября
Доступ в рестораны, кафе, магазины, салоны красоты, кинотеатры и поликлиники во время нерабочей недели с 30 октября по 7 ноября будет ограничен, выяснил Forbes. Ограничения коснутся всех, QR-коды действовать не будут.
Во вторник, 19 октября, вице-премьер России Татьяна Голикова предложила объявить нерабочими дни с 30 октября по 7 ноября из-за ухудшения ситуации с COVID-19. Такую инициативу поддержал премьер-министр Михаил Мишустин. В среду, 20 октября, ее обсудят на совещании с Владимиром Путиным.
Источник Forbes на ресторанном рынке, обычно присутствующий на совещаниях в московской мэрии по поводу ухудшения эпидемиологической обстановки, рассказал, что в период нерабочих дней в столице будут закрыты торговые центры, рестораны, кафе, запрещено посещение массовых мероприятий.
Исключений не будет даже для привитых граждан, введение QR-кодов не планируется.
Информацию о возможном закрытии салонов красоты и парикмахерских во время нерабочей недели подтвердил Forbes один из владельцев московской сети салонов красоты.
Еще один источник Forbes на ресторанном рынке подтвердил, что правительство Москвы собирается закрыть «не только рестораны, а вообще все — без возможности посещения по QR-кодам».
Ему неизвестно, когда именно город объявит об этих мерах.
О планах властей приостановить работу ресторанов, торговых центров, салонов красоты рестораторы узнали из проекта указа о «Краткосрочном локдауне на ноябрьские праздники» мэра города Сергея Собянина, говорит собеседник Forbes на ресторанном рынке. Документ есть в распоряжении редакции. С ним знаком и другой источник Forbes из ресторанной индустрии, но подтвердить его подлинность он не смог.
Согласно проекту указа, с 30 октября по 7 ноября включительно будет установлен режим работы выходного дня, который распространится на все организации и ИП, работающие на территории Москвы. Исключение — организации, деятельность которых не может быть ограничена.
Кроме того, согласно проекту указа, в тот же период будет приостановлен доступ посетителей и работников во все пункты питания (в том числе в парках), на объекты розничной торговли, в организации и ИП, оказывающие бытовые услуги, в салоны красоты, фитнес-клубы, медицинские организации для оказания плановой медицинской помощи, ветеринарные клиники, букмекерские конторы, театры и кинотеатры, детские игровые центры и зоопарки, а также на массовые спортивные, развлекательные и культурные мероприятия.
При этом меры не распространятся на заведения общепита, работающие навынос, аптеки и продуктовые магазины, онлайн-торговлю и доставку, официальные мероприятия, организуемые городом.
Краткосрочный локдаун на ноябрьские праздники будет введен, если общее количество выявленных на территории Москвы случаев заболевания коронавирусом с 21 по 28 октября будет больше, чем с 13 по 20 октября, следует из данных проекта указа.
19 октября власти Москвы ввели ограничения. Так, c 25 октября по 25 февраля работодателей обязали перевести на удаленку не меньше 30% сотрудников, в том числе всех лиц старше 60 лет и с хроническими заболеваниями, работодателей из сферы услуг обязали до 1 января обеспечить вакцинацию не меньше 80% сотрудников, а москвичи старше 60 лет и с хроническими заболеваниями c 25 октября до 25 февраля должны соблюдать самоизоляцию — дома или на даче. От самоизоляции освобождаются те, кто за последние полгода переболел или сделал прививку.
Юля Сапронова, Ксения Демидкина
Власти Москвы обсуждают введение «краткосрочного локдауна» с 30 октября по 7 ноября
Доступ в рестораны, кафе, магазины, салоны красоты, кинотеатры и поликлиники во время нерабочей недели с 30 октября по 7 ноября будет ограничен, выяснил Forbes. Ограничения коснутся всех, QR-коды действовать не будут.
Во вторник, 19 октября, вице-премьер России Татьяна Голикова предложила объявить нерабочими дни с 30 октября по 7 ноября из-за ухудшения ситуации с COVID-19. Такую инициативу поддержал премьер-министр Михаил Мишустин. В среду, 20 октября, ее обсудят на совещании с Владимиром Путиным.
Источник Forbes на ресторанном рынке, обычно присутствующий на совещаниях в московской мэрии по поводу ухудшения эпидемиологической обстановки, рассказал, что в период нерабочих дней в столице будут закрыты торговые центры, рестораны, кафе, запрещено посещение массовых мероприятий.
Исключений не будет даже для привитых граждан, введение QR-кодов не планируется.
Информацию о возможном закрытии салонов красоты и парикмахерских во время нерабочей недели подтвердил Forbes один из владельцев московской сети салонов красоты.
Еще один источник Forbes на ресторанном рынке подтвердил, что правительство Москвы собирается закрыть «не только рестораны, а вообще все — без возможности посещения по QR-кодам».
Ему неизвестно, когда именно город объявит об этих мерах.
О планах властей приостановить работу ресторанов, торговых центров, салонов красоты рестораторы узнали из проекта указа о «Краткосрочном локдауне на ноябрьские праздники» мэра города Сергея Собянина, говорит собеседник Forbes на ресторанном рынке. Документ есть в распоряжении редакции. С ним знаком и другой источник Forbes из ресторанной индустрии, но подтвердить его подлинность он не смог.
Согласно проекту указа, с 30 октября по 7 ноября включительно будет установлен режим работы выходного дня, который распространится на все организации и ИП, работающие на территории Москвы. Исключение — организации, деятельность которых не может быть ограничена.
Кроме того, согласно проекту указа, в тот же период будет приостановлен доступ посетителей и работников во все пункты питания (в том числе в парках), на объекты розничной торговли, в организации и ИП, оказывающие бытовые услуги, в салоны красоты, фитнес-клубы, медицинские организации для оказания плановой медицинской помощи, ветеринарные клиники, букмекерские конторы, театры и кинотеатры, детские игровые центры и зоопарки, а также на массовые спортивные, развлекательные и культурные мероприятия.
При этом меры не распространятся на заведения общепита, работающие навынос, аптеки и продуктовые магазины, онлайн-торговлю и доставку, официальные мероприятия, организуемые городом.
Краткосрочный локдаун на ноябрьские праздники будет введен, если общее количество выявленных на территории Москвы случаев заболевания коронавирусом с 21 по 28 октября будет больше, чем с 13 по 20 октября, следует из данных проекта указа.
19 октября власти Москвы ввели ограничения. Так, c 25 октября по 25 февраля работодателей обязали перевести на удаленку не меньше 30% сотрудников, в том числе всех лиц старше 60 лет и с хроническими заболеваниями, работодателей из сферы услуг обязали до 1 января обеспечить вакцинацию не меньше 80% сотрудников, а москвичи старше 60 лет и с хроническими заболеваниями c 25 октября до 25 февраля должны соблюдать самоизоляцию — дома или на даче. От самоизоляции освобождаются те, кто за последние полгода переболел или сделал прививку.
Юля Сапронова, Ксения Демидкина
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
Re: КОРОНАВИРУС
Дежа вю )). Только без Путина на этот раз обошлись.Radugnyi писал(а):Вот так вот. Сидите дома - зарабатывайте себе агарофобию)).
Привитым особенно обидно, зря кололи всякую дрянь.
А у нас какой-то супер интересный музей был запланирован... интересно, музеи закроют?
Кстати, про 30% еще вчера было известно, а у нас в компании еще нет приказа. А я то уж раскатала губищи ))).
Верните каждому своё, пусть все идут своим путём, приобретя утраты. (С)
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
Положительный момент - дошло, что QR кодами вопрос нельзя решить. Может дойдёт, что и прививками нельзя, начнут вводить обязательные проф осмотры и психиатрические экспертизы на местах и в регионах. Тогда выяснится, что у нас пандемия психозов и неврозов)).Matryona писал(а):
Дежа вю )). Только без Путина на этот раз обошлись.
Привитым особенно обидно, зря кололи всякую дрянь.
А у нас какой-то супер интересный музей был запланирован... интересно, музеи закроют?
Кстати, про 30% еще вчера было известно, а у нас в компании еще нет приказа. А я то уж раскатала губищи ))).
Правильно Лукашенко сказал - надо лечить, то есть, разрабатывать курс лечения и профилактику и ловить на ранних периодах заболевания. А маски и ограничения до жопы, по моему, уже выяснили опытным путем((.
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
Эта музыка будет вечной... Интересно, а они успеют ВСЕ культурно -физкультурно - массовые мероприятия по всей стране обеспечить считывателями QR кодов?)) А то сейчас у всех будет в Госуслугах код по переписи населения - какая хуй разница? QR код и QR код, главное же из Госуслуг, да?
Нерабочие дни, локдаун в Москве и другие меры из-за COVID. Главное.
На фоне стремительного роста числа заболевших COVID-19 и смертельных случаев Владимир Путин согласился ввести нерабочие дни. Москва и Подмосковье объявили частичный локдаун. РБК собрал основные ограничения.
Президент Владимир Путин в ходе онлайн-совещания с правительством согласился с предложениями о новых ограничениях в связи со стремительным ростом заболеваемости коронавирусом. Дополнительные меры предложила вице-премьер Татьяна Голикова по итогам заседания федерального оперативного штаба.
Владимир Путин одобрил введение с 30 октября по 7 ноября нерабочих дней с сохранением заработной платы. По словам президента, это необходимо, чтобы уйти с нынешнего пика распространения болезни.
В регионах с наиболее сложной ситуацией режим нерабочих дней может начаться уже 23 октября или продлиться после 7 ноября. Как отметил Путин, решение будут принимать сами регионы на основании имеющихся у них полномочий.
Среди прочих одобренных предложений — вопрос о допуске на отдельные объекты исключительно для вакцинированных и переболевших коронавирусом при предъявлении QR-кода. Голикова предлагала расширить эту практику и распространить ее на всю страну при посещении культурных и зрелищных мероприятий.
Еще одно предложение — обратиться к работодателям, чтобы они предоставили два выходных дня для работников, которые пройдут вакцинацию. Путин заявил, что можно было бы обсудить и более широкое применение этого механизма с сохранением заработной платы.
Помимо этого Голикова предложила регионам, не дожидаясь нерабочих дней, перевести на самоизоляцию невакцинированных и не переболевших коронавирусом лиц старше 60 лет. По ее словам, в этом случае у людей будет возможность привиться.
Помимо этого президенту было предложено прекратить работу общепита и зрелищных мероприятий с 23:00 до 8:00.
Владимир Путин предложил увеличить число тестирований, чтобы «разорвать цепочку распространения». Также президент обратился с просьбой к регионам не занижать статистику, а к гражданам — соблюдать режим самоизоляции в случае заболевания.
Глава правительства Михаил Мишустин накануне поручил первому вице-премьеру Андрею Белоусову и министру экономического развития Максиму Решетникову подготовить новые меры поддержки бизнеса в условиях пандемии. В ходе совещания у президента Белоусов указал, что предоставление льготных кредитов должно быть увязано с численностью работников предприятий. Президент выразил надежду, что это будет сделано так же организованно и эффективно, как и в прошлый раз.
Новые ограничительные меры в Москве
В соответствии с указом мэра Москвы Сергея Собянина, который был обнародован 21 октября, нерабочие дни продлятся в столице на два дня дольше и начнутся 28 октября. На это время в городе фактически вводится частичный локдаун.
В Москве будут закрыты:
предприятия общепита;
салоны красоты, СПА-салоны, фитнес-клубы, физкультурно-оздоровительные комплексы.
Помимо этого приостанавливается доступ:
на массовые физкультурные, спортивные мероприятия;
на культурные, просветительские мероприятия (в том числе в выставочные залы, библиотеки, на лекции);
в кинотеатры, концертные залы, цирки.
Посещение музеев и театров будет разрешено при предъявлении QR-кодов.
После 8 ноября и до улучшения эпидемиологической ситуации:
для граждан с хроническими заболеваниями и москвичей старше 60 лет, которые не прошли вакцинацию и не переболели коронавирусной инфекцией, будет приостановлена возможность льготного и бесплатного проезда по социальным картам;
посещение концертных, развлекательных, культурных, зрелищных мероприятий будет возможно только при использовании QR-кодов.
В Московской области нерабочие дни объявлены тоже с 28 октября, а ограничения будут такими же, как и в Москве.
Руководитель департамента экономической политики и развития Москвы Кирилл Пуртов заверил, что власти обсудят с предпринимателями дополнительные меры поддержки бизнеса и примут по ним решение.
Власти Москвы вводят новые меры для борьбы с COVID-19 во второй раз за неделю. О предыдущих ограничениях Собянин объявил 19 октября. В частности, он заявил о необходимости изоляции для граждан старше 60 лет. По словам Собянина, из 3 млн горожан в возрасте 60+ вакцинацию прошли лишь чуть больше трети (1,14 млн). При этом именно москвичи старше 60 лет составляют 60% пациентов ковидных стационаров, а среди умерших от последствий коронавируса их доля достигает 86%.
Ограничения, введенные 19 октября:
Москвичи в возрасте старше 60 лет и граждане, страдающие хроническими заболеваниями, с 25 октября по 25 февраля 2022 года должны соблюдать домашний режим — по месту постоянного жительства либо на садовых участках. Работающие граждане вправе оформить больничный.
Переведенным на домашний режим в соответствии с решением мэрии не ограничат прогулки и занятия физической культурой на свежем воздухе.
С 25 октября по 25 февраля 2022 года работодатели обязаны перевести на дистанционный режим не менее 30% работников, а также всех сотрудников старше 60 лет и страдающих хроническими заболеваниями.
От домашнего режима освобождаются те, кто в последние полгода переболел COVID-19 или прошел вакцинацию.
Также Собянин обязал предприятия и организации сферы услуг обеспечить вакцинацию не менее 80% от общего числа сотрудников (первым компонентом до 1 декабря, вторым — до 1 января 2022 года).
Ограничения в других регионах
Власти Крыма приняли решение об обязательном использовании QR-кодов или сертификатов о вакцинации или отрицательных ПЦР-тестов при посещении кафе, ресторанов, ночных клубов, концертных и танцевальных залов, салонов красоты, соляриев, саун, плавательных бассейнов, бань, центров досуга, кинотеатров, театров, библиотек и музеев, цирков.
Губернатор Краснодарского края Вениамин Кондратьев в своем Telegram канале сообщил, что с 30 октября по 7 ноября в городах-курортах региона вход в рестораны, кафе и другие досуговые учреждения будет возможен только при наличии QR-кода из личного кабинета госуслуг.
В Курской области нерабочими объявлены дни с 25 октября по 7 ноября.
Ситуация с заболеваемостью
19 октября Голикова констатировала тот факт, что уровень коллективного иммунитета в стране достиг лишь 45%, что не позволяет существенно влиять на смертность от последствий коронавируса.
Глава Минздрава Михаил Мурашко отметил, что среди заболевших выросло число пациентов в тяжелом состоянии.
Мурашко назвал несколько регионов, в которых ситуация «напряженная». Это Удмуртия, Башкирия, Татарстан, Пермский край, Оренбургская, Ивановская и Тюменская области.
Ранее о критической ситуации в Орловской области рассказал губернатор региона Андрей Клычков. По его словам, в области закончились свободные койки для больных коронавирусом.
По данным федерального штаба, за последние сутки в России выявлено 36 339 случая заболевания (рекордный показатель). Умерли 1036 человек, что стало максимальным результатом с начала пандемии.
Как работаем в нерабочие дни
Окончательное решение не принято, так что разъяснений по работе компаний от властей пока нет. Но если нерабочие дни будут официально объявлены, рекомендации Минтруда вряд ли будут отличаться от майских.
По нерабочим дням с 4 по 7 мая основные рекомендации для работников и работодателей звучали так:
— Сотрудники организаций, которые трудятся дистанционно, могут продолжить работу. Смысл нерабочих дней — в борьбе с распространением COVID-19, так что «удаленка» только приветствуется.
— Сколько сотрудников нужно выводить на работу физически, компании должны решить сами. Например, соответствующие приказы должны издать владельцы продовольственных магазинов, руководители предприятий непрерывного производства.
— В организациях, где нет производства в нерабочие дни, работодатель должен оформить выход тех сотрудников, которые отвечают за соблюдение обязательных норм: промышленной и транспортной безопасности, антитеррористической защищенности.
— Оплачивается работа в нерабочие дни в обычном, а не повышенном размере. Если работодатель не решит иначе.
— Сокращать зарплаты из-за нерабочих дней компании не могут.
Артем Филипенок
Нерабочие дни, локдаун в Москве и другие меры из-за COVID. Главное.
На фоне стремительного роста числа заболевших COVID-19 и смертельных случаев Владимир Путин согласился ввести нерабочие дни. Москва и Подмосковье объявили частичный локдаун. РБК собрал основные ограничения.
Президент Владимир Путин в ходе онлайн-совещания с правительством согласился с предложениями о новых ограничениях в связи со стремительным ростом заболеваемости коронавирусом. Дополнительные меры предложила вице-премьер Татьяна Голикова по итогам заседания федерального оперативного штаба.
Владимир Путин одобрил введение с 30 октября по 7 ноября нерабочих дней с сохранением заработной платы. По словам президента, это необходимо, чтобы уйти с нынешнего пика распространения болезни.
В регионах с наиболее сложной ситуацией режим нерабочих дней может начаться уже 23 октября или продлиться после 7 ноября. Как отметил Путин, решение будут принимать сами регионы на основании имеющихся у них полномочий.
Среди прочих одобренных предложений — вопрос о допуске на отдельные объекты исключительно для вакцинированных и переболевших коронавирусом при предъявлении QR-кода. Голикова предлагала расширить эту практику и распространить ее на всю страну при посещении культурных и зрелищных мероприятий.
Еще одно предложение — обратиться к работодателям, чтобы они предоставили два выходных дня для работников, которые пройдут вакцинацию. Путин заявил, что можно было бы обсудить и более широкое применение этого механизма с сохранением заработной платы.
Помимо этого Голикова предложила регионам, не дожидаясь нерабочих дней, перевести на самоизоляцию невакцинированных и не переболевших коронавирусом лиц старше 60 лет. По ее словам, в этом случае у людей будет возможность привиться.
Помимо этого президенту было предложено прекратить работу общепита и зрелищных мероприятий с 23:00 до 8:00.
Владимир Путин предложил увеличить число тестирований, чтобы «разорвать цепочку распространения». Также президент обратился с просьбой к регионам не занижать статистику, а к гражданам — соблюдать режим самоизоляции в случае заболевания.
Глава правительства Михаил Мишустин накануне поручил первому вице-премьеру Андрею Белоусову и министру экономического развития Максиму Решетникову подготовить новые меры поддержки бизнеса в условиях пандемии. В ходе совещания у президента Белоусов указал, что предоставление льготных кредитов должно быть увязано с численностью работников предприятий. Президент выразил надежду, что это будет сделано так же организованно и эффективно, как и в прошлый раз.
Новые ограничительные меры в Москве
В соответствии с указом мэра Москвы Сергея Собянина, который был обнародован 21 октября, нерабочие дни продлятся в столице на два дня дольше и начнутся 28 октября. На это время в городе фактически вводится частичный локдаун.
В Москве будут закрыты:
предприятия общепита;
салоны красоты, СПА-салоны, фитнес-клубы, физкультурно-оздоровительные комплексы.
Помимо этого приостанавливается доступ:
на массовые физкультурные, спортивные мероприятия;
на культурные, просветительские мероприятия (в том числе в выставочные залы, библиотеки, на лекции);
в кинотеатры, концертные залы, цирки.
Посещение музеев и театров будет разрешено при предъявлении QR-кодов.
После 8 ноября и до улучшения эпидемиологической ситуации:
для граждан с хроническими заболеваниями и москвичей старше 60 лет, которые не прошли вакцинацию и не переболели коронавирусной инфекцией, будет приостановлена возможность льготного и бесплатного проезда по социальным картам;
посещение концертных, развлекательных, культурных, зрелищных мероприятий будет возможно только при использовании QR-кодов.
В Московской области нерабочие дни объявлены тоже с 28 октября, а ограничения будут такими же, как и в Москве.
Руководитель департамента экономической политики и развития Москвы Кирилл Пуртов заверил, что власти обсудят с предпринимателями дополнительные меры поддержки бизнеса и примут по ним решение.
Власти Москвы вводят новые меры для борьбы с COVID-19 во второй раз за неделю. О предыдущих ограничениях Собянин объявил 19 октября. В частности, он заявил о необходимости изоляции для граждан старше 60 лет. По словам Собянина, из 3 млн горожан в возрасте 60+ вакцинацию прошли лишь чуть больше трети (1,14 млн). При этом именно москвичи старше 60 лет составляют 60% пациентов ковидных стационаров, а среди умерших от последствий коронавируса их доля достигает 86%.
Ограничения, введенные 19 октября:
Москвичи в возрасте старше 60 лет и граждане, страдающие хроническими заболеваниями, с 25 октября по 25 февраля 2022 года должны соблюдать домашний режим — по месту постоянного жительства либо на садовых участках. Работающие граждане вправе оформить больничный.
Переведенным на домашний режим в соответствии с решением мэрии не ограничат прогулки и занятия физической культурой на свежем воздухе.
С 25 октября по 25 февраля 2022 года работодатели обязаны перевести на дистанционный режим не менее 30% работников, а также всех сотрудников старше 60 лет и страдающих хроническими заболеваниями.
От домашнего режима освобождаются те, кто в последние полгода переболел COVID-19 или прошел вакцинацию.
Также Собянин обязал предприятия и организации сферы услуг обеспечить вакцинацию не менее 80% от общего числа сотрудников (первым компонентом до 1 декабря, вторым — до 1 января 2022 года).
Ограничения в других регионах
Власти Крыма приняли решение об обязательном использовании QR-кодов или сертификатов о вакцинации или отрицательных ПЦР-тестов при посещении кафе, ресторанов, ночных клубов, концертных и танцевальных залов, салонов красоты, соляриев, саун, плавательных бассейнов, бань, центров досуга, кинотеатров, театров, библиотек и музеев, цирков.
Губернатор Краснодарского края Вениамин Кондратьев в своем Telegram канале сообщил, что с 30 октября по 7 ноября в городах-курортах региона вход в рестораны, кафе и другие досуговые учреждения будет возможен только при наличии QR-кода из личного кабинета госуслуг.
В Курской области нерабочими объявлены дни с 25 октября по 7 ноября.
Ситуация с заболеваемостью
19 октября Голикова констатировала тот факт, что уровень коллективного иммунитета в стране достиг лишь 45%, что не позволяет существенно влиять на смертность от последствий коронавируса.
Глава Минздрава Михаил Мурашко отметил, что среди заболевших выросло число пациентов в тяжелом состоянии.
Мурашко назвал несколько регионов, в которых ситуация «напряженная». Это Удмуртия, Башкирия, Татарстан, Пермский край, Оренбургская, Ивановская и Тюменская области.
Ранее о критической ситуации в Орловской области рассказал губернатор региона Андрей Клычков. По его словам, в области закончились свободные койки для больных коронавирусом.
По данным федерального штаба, за последние сутки в России выявлено 36 339 случая заболевания (рекордный показатель). Умерли 1036 человек, что стало максимальным результатом с начала пандемии.
Как работаем в нерабочие дни
Окончательное решение не принято, так что разъяснений по работе компаний от властей пока нет. Но если нерабочие дни будут официально объявлены, рекомендации Минтруда вряд ли будут отличаться от майских.
По нерабочим дням с 4 по 7 мая основные рекомендации для работников и работодателей звучали так:
— Сотрудники организаций, которые трудятся дистанционно, могут продолжить работу. Смысл нерабочих дней — в борьбе с распространением COVID-19, так что «удаленка» только приветствуется.
— Сколько сотрудников нужно выводить на работу физически, компании должны решить сами. Например, соответствующие приказы должны издать владельцы продовольственных магазинов, руководители предприятий непрерывного производства.
— В организациях, где нет производства в нерабочие дни, работодатель должен оформить выход тех сотрудников, которые отвечают за соблюдение обязательных норм: промышленной и транспортной безопасности, антитеррористической защищенности.
— Оплачивается работа в нерабочие дни в обычном, а не повышенном размере. Если работодатель не решит иначе.
— Сокращать зарплаты из-за нерабочих дней компании не могут.
Артем Филипенок
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
Re: КОРОНАВИРУС
А у нас приказа нет. В прошлый локдаун работали - мы госконтракты выполняем. Да, большинство предприятий получили такие разрешения.
Верните каждому своё, пусть все идут своим путём, приобретя утраты. (С)
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
А мы итак на дистанционке, так что, этот праздник не для нас)). Может оплатят хотя бы 1,5:1. Видишь, они очень хитро формулировку сделали - нерабочие дни, были бы праздничные - можно было бы без выходных отработать и готова поездка в Питер))).Matryona писал(а):А у нас приказа нет. В прошлый локдаун работали - мы госконтракты выполняем. Да, большинство предприятий получили такие разрешения.
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
Ура! Человечество изобрело панацею! Никаких противопоказаний! Можно всем! И никого ничего не смущает...
Эксперт рассказала, что может быть пожизненным медотводом к вакцинации от COVID-19
МОСКВА, 22 октября. /ТАСС/. Абсолютным противопоказанием к вакцинации против новой коронавирусной инфекции может быть только тяжелая аллергическая реакция на препарат или его компоненты, в остальных случаях противопоказания временные. Об этом ТАСС сообщила доктор медицинских наук, заместитель директора по клинической работе Московского научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии имени Г. Н. Габричевского Роспотребнадзора Татьяна Руженцова.
«Абсолютным противопоказанием к введению вакцины, которое остается пожизненно, является только тяжелая аллергическая реакция в анамнезе на именно эту вакцину или какой-либо ее компонент: анафилактический шок, отек Квинке, судороги, температура тела выше 40 градусов, инфильтрат более 8 см в диаметре. Остальные противопоказания — временные», — сказала она.
Руженцова отметила, что граждане, у которых есть медотвод к вакцинации, должны особо тщательно соблюдать все имеющиеся рекомендации для профилактики заболевания, по возможности избегать мест скопления людей и контактов с теми, кто может быть больным или вирусоносителем.
«Нужно посоветоваться с лечащим врачом о возможности применения каких-либо профилактических препаратов», — добавила она.
Как ранее сообщили в федеральном оперативном штабе по борьбе с новым заболеванием, на 15 октября в РФ вакцинация первым компонентом проведена 51 млн раз, обоими — 47,5 млн раз. Коллективный иммунитет к ковиду в России оценивается на уровне 45%.
Эксперт рассказала, что может быть пожизненным медотводом к вакцинации от COVID-19
МОСКВА, 22 октября. /ТАСС/. Абсолютным противопоказанием к вакцинации против новой коронавирусной инфекции может быть только тяжелая аллергическая реакция на препарат или его компоненты, в остальных случаях противопоказания временные. Об этом ТАСС сообщила доктор медицинских наук, заместитель директора по клинической работе Московского научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии имени Г. Н. Габричевского Роспотребнадзора Татьяна Руженцова.
«Абсолютным противопоказанием к введению вакцины, которое остается пожизненно, является только тяжелая аллергическая реакция в анамнезе на именно эту вакцину или какой-либо ее компонент: анафилактический шок, отек Квинке, судороги, температура тела выше 40 градусов, инфильтрат более 8 см в диаметре. Остальные противопоказания — временные», — сказала она.
Руженцова отметила, что граждане, у которых есть медотвод к вакцинации, должны особо тщательно соблюдать все имеющиеся рекомендации для профилактики заболевания, по возможности избегать мест скопления людей и контактов с теми, кто может быть больным или вирусоносителем.
«Нужно посоветоваться с лечащим врачом о возможности применения каких-либо профилактических препаратов», — добавила она.
Как ранее сообщили в федеральном оперативном штабе по борьбе с новым заболеванием, на 15 октября в РФ вакцинация первым компонентом проведена 51 млн раз, обоими — 47,5 млн раз. Коллективный иммунитет к ковиду в России оценивается на уровне 45%.
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
Re: КОРОНАВИРУС
Radugnyi писал(а):
Эксперт рассказала, что может быть пожизненным медотводом к вакцинации от COVID-19
МОСКВА, 22 октября. /ТАСС/. Абсолютным противопоказанием к вакцинации против новой коронавирусной инфекции может быть только тяжелая аллергическая реакция на препарат или его компоненты, в остальных случаях
В общем вывод такой: если ты не склеил ласты в течении 20 минут после прививки, поди докажи, что это осложнение ))).
Верните каждому своё, пусть все идут своим путём, приобретя утраты. (С)
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
А тем временем...
В Белоруссии отменили масочный режим после слов Лукашенко о «намордниках»
Минздрав объявил о введении масочного режима и социальной дистанции по всей Белоруссии две недели назад. Глава государства раскритиковал это решение. «Почему подняли гвалт на всю страну?» — задавался вопросом Лукашенко.
Министерство здравоохранения Белоруссии отменило требование об обязательном масочном режиме для граждан в условиях распространения коронавируса COVID-19. Разъяснения о документе, опубликованном на национальном правовом интернет-портале, представила пресс-служба ведомства в Telegram.
В Минздраве сообщали, что правила ношения масок и соблюдения социальной дистанции будут действовать в том числе при посещении магазинов, общепита, театров, кинотеатров, культурно-массовых мероприятий, стадионов, предприятий, учреждений здравоохранения, аптек, а также в общественном транспорте, включая такси.
19 октября президент Белоруссии Александр Лукашенко на совещании по эпидемиологической ситуации раскритиковал чиновников за ужесточение мер против COVID-19 и введение штрафов. «Если вы к президенту спокойно заходите, то зачем же вы издеваетесь над людьми? Ко мне действительно ни один человек никогда не приходил в намордниках, не спрашивал, вакцинирован или нет, ПЦР-тесты не делали», — сказал он.
Лукашенко также обратил внимание на проверки соблюдения масочного режима. «Почему подняли гвалт на всю страну? Почему милицию мобилизовали на проверки масочного режима? Щупаете везде, даже женщин не щадя», — заявил президент.
Глава государства пригрозил чиновникам, что им «мало не покажется», если жалобы граждан на действия властей из-за ситуации с коронавирусом перерастут в политическую проблему. Он указал на необходимость соблюдения мер и наращивания темпов вакцинации, но отметил, что людей нужно просить, а не заставлять.
В Белоруссии отменили масочный режим после слов Лукашенко о «намордниках»
Минздрав объявил о введении масочного режима и социальной дистанции по всей Белоруссии две недели назад. Глава государства раскритиковал это решение. «Почему подняли гвалт на всю страну?» — задавался вопросом Лукашенко.
Министерство здравоохранения Белоруссии отменило требование об обязательном масочном режиме для граждан в условиях распространения коронавируса COVID-19. Разъяснения о документе, опубликованном на национальном правовом интернет-портале, представила пресс-служба ведомства в Telegram.
9 октября белорусский Минздрав сообщил, что во всех регионах страны наблюдается неблагополучная эпидемиологическая ситуация. В связи с этим ведомство объявило о введении масочного режима и социальной дистанции по всей Белоруссии. Это первый случай за все время пандемии, когда масочный режим решили ввести сразу во всех регионах. Осенью прошлого года он уже действовал повсеместно, в том числе в Минске, но требование по очереди вводили отдельные регионы. Кроме того, раньше за несоблюдение ограничений отвечали только юрлица. Организацию могли оштрафовать, а вот для граждан никакого наказания не предусматривалось. Теперь в правила внесли изменение: за нарушение установленных мер безопасности могут ответить и сами нарушители.Исключено требование к обязательности использования физическими лицами средств индивидуальной защиты при посещении объектов, организаций, автомобильного, за исключением автомобилей личного пользования, воздушного, водного, железнодорожного транспорта, включая метрополитен.
Министерство здравоохранения Белоруссии
В Минздраве сообщали, что правила ношения масок и соблюдения социальной дистанции будут действовать в том числе при посещении магазинов, общепита, театров, кинотеатров, культурно-массовых мероприятий, стадионов, предприятий, учреждений здравоохранения, аптек, а также в общественном транспорте, включая такси.
19 октября президент Белоруссии Александр Лукашенко на совещании по эпидемиологической ситуации раскритиковал чиновников за ужесточение мер против COVID-19 и введение штрафов. «Если вы к президенту спокойно заходите, то зачем же вы издеваетесь над людьми? Ко мне действительно ни один человек никогда не приходил в намордниках, не спрашивал, вакцинирован или нет, ПЦР-тесты не делали», — сказал он.
Лукашенко также обратил внимание на проверки соблюдения масочного режима. «Почему подняли гвалт на всю страну? Почему милицию мобилизовали на проверки масочного режима? Щупаете везде, даже женщин не щадя», — заявил президент.
Глава государства пригрозил чиновникам, что им «мало не покажется», если жалобы граждан на действия властей из-за ситуации с коронавирусом перерастут в политическую проблему. Он указал на необходимость соблюдения мер и наращивания темпов вакцинации, но отметил, что людей нужно просить, а не заставлять.
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
Re: КОРОНАВИРУС
Ну, вот, за некоторых уже можно не беспокоиться.
Верните каждому своё, пусть все идут своим путём, приобретя утраты. (С)
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
Это очень сильное колдунство! Сразу хочется спросить словами героя Геннадия Хазанова: "А от геморроя не лечите?"))Matryona писал(а): Ну, вот, за некоторых уже можно не беспокоиться.
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
))
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
Слушаю его и с ужасом осознаю, что вполне реален вариант, что пандемия и цифровизация откинет нас в развитии, даже не в средневековье, а ещё дальше, к древней Греции, когда мыслителей было раз -два и обчелся и к ним очереди выстраивались за советом, Оракулы, своеобразные. То есть, вполне вероятно, что профессиональные потреблятели, начнут нанимать профессиональных мыслителей просто для того, что бы помочь установить причинно - следственные связи в какой-либо ситуации. Мол, милая, ну ты же с ним переспала, потому и забеременела, а от минета ещё ни у кого детей не было: хоть глотай, хоть выплёвывай и в огород в капусту тоже бесполезно ходить и аистов приманивать тоже...
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
- Radugnyi
- Психолог
- Сообщения: 31140
- Зарегистрирован: 28 апр 2015, 11:19
- Репутация: 13987
- Откуда: СССР
Re: КОРОНАВИРУС
Смерти от вакцинации в России решили не фиксировать в общей статистике
Российский Минздрав предписал не включать в общее число умерших от COVID-19 тех, кто скончался после вакцинации от коронавируса. Такая установка содержится в новой версии «Методических рекомендаций по кодированию и выбору основного состояния в статистике заболеваемости и первоначальной причины смерти, связанных с COVID-19», с которой ознакомился «Медицинский вестник».
Все неблагоприятные реакции на вакцинацию должны кодироваться новой рубрикой U12.9, пишет 15 июля издание. При этом код применяется только в качестве внешней причины смерти. Сейчас к таким относятся, например, убийства и самоубийства, несчастные случаи и ДТП, утопления, отравления и падения. То есть это так называемые предотвратимые смерти.
При этом официальная статистика смертности после введения вакцины против коронавируса в России не публикуется.
Российский Минздрав предписал не включать в общее число умерших от COVID-19 тех, кто скончался после вакцинации от коронавируса. Такая установка содержится в новой версии «Методических рекомендаций по кодированию и выбору основного состояния в статистике заболеваемости и первоначальной причины смерти, связанных с COVID-19», с которой ознакомился «Медицинский вестник».
Все неблагоприятные реакции на вакцинацию должны кодироваться новой рубрикой U12.9, пишет 15 июля издание. При этом код применяется только в качестве внешней причины смерти. Сейчас к таким относятся, например, убийства и самоубийства, несчастные случаи и ДТП, утопления, отравления и падения. То есть это так называемые предотвратимые смерти.
При этом официальная статистика смертности после введения вакцины против коронавируса в России не публикуется.
"Подумай, как трудно изменить себя самого, и ты поймешь, сколь ничтожны твои возможности изменить других." Вольтер
Re: КОРОНАВИРУС
Lockdown ("локдаун") -впервые это понятие начали использовать в 1970-ых годах в США в качестве меры безопасности в тюрьмах. Строгую изоляцию вводили с целью предотвратить тюремные бунты или беспорядки во время чрезвычайных происшествий. Кстати, есть американский фильм «Lockdown», связанный именно с тюрьмой.
Верните каждому своё, пусть все идут своим путём, приобретя утраты. (С)
Re: КОРОНАВИРУС
Упс. То есть люди, которые говорят о "чипировании" не так уж и глупы?
Гинцбург: около 80% якобы привившихся "Спутником V" и заболевших купили сертификат
Директор НИЦЭМ им. Н. Ф. Гамалеи пояснил, что проверить, вакцинировался человек или нет, можно с помощью специального анализа на наличие маркеров препарата
МОСКВА, 25 октября. /ТАСС/. Около 80% граждан, которые говорят о том, что привились "Спутником V", но при этом заболели новой коронавирусной инфекцией в тяжелой форме, купили сертификат о вакцинации. Такое мнение высказал ТАСС директор Национального исследовательского центра эпидемиологии и микробиологии имени Н. Ф. Гамалеи Александр Гинцбург.
"Если вакцинированные якобы "Спутником V" тяжело заболевают, как показывают данные, это люди, которые, к сожалению, воспользовались теми сертификатами, которые они купили, поддельными сертификатами. Среди них 80% те, которые купили", - сказал он.
Гинцбург пояснил, что проверить, вакцинировался ли человек "Спутником V" или нет, можно с помощью специального анализа на наличие маркеров препарата: "Мы видим, что у людей отсутствуют эти маркеры в 80% случаев".
Ученый также предположил, что те публичные дела о покупке сертификатов о вакцинации, которые сегодня существуют, это лишь часть того, что происходит на самом деле. "Люди тратят деньги, а потом за собственные же деньги заболевают и умирают. Они обманывают сами себя. У них, видимо, психологически меняется представление. Они думают, что действительно привиты, ослабляют всякие карантинные ограничения. И риск заболевания у них резко возрастает в результате того, что у них изменяется поведение. Кроме того, они подвергают смертельной угрозе других", - заключил он.
https://tass.ru/obschestvo/12750415
Верните каждому своё, пусть все идут своим путём, приобретя утраты. (С)